20 кэв: Калорифер электрический КЭВ-20 купить в Москве по цене 20 300 руб.

Тепловая завеса КЭВ-20П2111W – Афалина ГК

Тепловая завеса КЭВ-20П2111W – Афалина ГК

Группа Компаний “Афалина” – Промышленное и строительное оборудование

Выбрать город

Челябинск (351) 700-77-39

Выберите город

• Челябинск
• Екатеринбург
• Магнитогорск

• Каталог оборудования
• Бренды
• Главная
• О компании
  • 3D тур
  • История
  • Сертификаты
• Полезные статьи
• Сервис
• Контакты

(351) 700-77-39 | site@afalina74.

ru

Описание

Тепловая завеса Комфорт для проемов высотой от 2 м до 2,5 м. Переднее всасывание воздуха допускает установку завесы в ограниченном пространстве. По заказу панель – из нержавеющей стали.

Комплектация

Воздушно-тепловая завеса Комфорт, пульт управления завесой IR03, комплект крепежных кронштейнов, паспорт.

Технические характеристики

Длина завесы	1
Тепловая мощность (кВт)	..
Тип завесы	Офисная
Серия	200 Комфорт
Степень защиты	IP21
Источник тепла	водяной
Параметры питающей сети, В/Гц	220/50
Режимы мощности, кВт	0-3-6
Расход воздуха, м3/час	700-850-1000
Скорость воздуха на выходе из сопла, м/с	6. 5
Эффективная длина струи, м	2.5
Длина, мм	1015
Ширина, мм	280
Высота, мм	225
Масса, кг	15
Цвет	корпус светло-серый RAL 7004, передняя панель – белая RAL 9003
Максимальный ток при номинальном напряжении, A	0.5
Потребляемая мощность двигателя, Вт	100
Звуковое давление на расстоянии 5 м, дБ (A)	50
Длина упаковки, м	1.052
Ширина упаковки, м	0.307
Высота упаковки, м	0.344
Вес упаковки, кг	17. 7
Способ установки	горизонтально и вертикально
Декларация о соответствии ТС	ТС № RU Д-RU.АУ04.B.26272
Страна производства	Россия, Санкт-Петербург
Гарантия, мес	24

• Тепловая завеса КЭВ-П2112А
• Тепловая завеса КЭВ-6П2212Е
• Тепловая завеса КЭВ-6П2012Е
• Тепловая завеса КЭВ-9П2012Е
• Тепловая завеса КЭВ-П2111A
• Тепловая завеса КЭВ-6П2011E
• Тепловая завеса КЭВ-6П2211E
• Тепловая завеса КЭВ-9П2011E
• Тепловая завеса КЭВ-П2113A
• Тепловая завеса КЭВ-6П2213Е
• Тепловая завеса КЭВ-6П2013E
• Тепловая завеса КЭВ-П2122А
• Тепловая завеса КЭВ-9П2013E
• Тепловая завеса КЭВ-П2121A
• Тепловая завеса КЭВ-6П2022Е
• Тепловая завеса КЭВ-6П2222Е
• Тепловая завеса КЭВ-9П2022Е
• Тепловая завеса КЭВ-12П2022Е
• Тепловая завеса КЭВ-6П2221E
• Тепловая завеса КЭВ-6П2021E
• Тепловая завеса КЭВ-П2123A
• Тепловая завеса КЭВ-9П2021E
• Тепловая завеса КЭВ-12П2021E
• Тепловая завеса КЭВ-6П2223E
• Тепловая завеса КЭВ-6П2023E
• Тепловая завеса КЭВ-9П2023E
• Тепловая завеса КЭВ-12П2023E
• Тепловая завеса КЭВ-29П2121W

Здесь Вы можете отправить свою заявку на любое интересующее Вас оборудование или задать вопрос, не отходя от Вашего компьютера. Обязательные для заполнения поля отмечены звездочкой (*).

* Ваше Имя:	Пример: Сидоров Иван Петрович	*Текст сообщения: Информация о заказе, либо любой интересующий вопрос пишется в произвольной форме. Сообщение будет обработано нашим менеджером.
* Ваш телефон:	Пример: 8-351-2345678
Ваш Город:	Пример: Челябинск
Ваш E-Mail:	Пример: [email protected]
* Введите код:	Пример: abc3127
Special

Тепловая завеса Тепломаш КЭВ-200П5120W

похожие товары

Смотреть все
проедложения

Тепловая завеса Тепломаш КЭВ-190П5141W

Напряжение сети, В: 220

Артикул: 135022

Тепловая мощность, кВт: 101

Длина завесы, м. : 2

Эффективная длина струи, м.: 6,5

Производитель: Тепломаш

Вес, кг.: 82

Источник тепла: Водяные

Производительность, м.куб./час: 8800

Степень защиты, IP: 21

Потребляемая мощность двигателя, Вт: 1100

Размеры, ДхШхВ, мм: 2120х560х420

Все характеристики

126128

P

– +

Отправить заявку

Тепловая завеса Ballu BHC-M10W12-PS

Напряжение сети, В: 220

Артикул: НС-1116107

Тепловая мощность, кВт: 11.3

Длина завесы, м.: 1

Эффективная длина струи, м.: 3.5

Производитель: Ballu

Вес, кг.: 19

Источник тепла: Водяные

Производительность, м. куб./час: 1400

Степень защиты, IP: 21

Потребляемая мощность двигателя, Вт: 100

Размеры, ДхШхВ, мм: 1090х260х240

Все характеристики

Цена по запросу

– +

Отправить заявку

Тепловая завеса Тепломаш КЭВ-85П4144W

Напряжение сети, В: 220

Артикул: 134022

Тепловая мощность, кВт: 41,2

Длина завесы, м.: 2

Эффективная длина струи, м.: 4,5

Производитель: Тепломаш

Вес, кг.: 45

Источник тепла: Водяные

Производительность, м.куб./час: 5000

Степень защиты, IP: 21

Потребляемая мощность двигателя, Вт: 580

Размеры, ДхШхВ, мм: 1805х405х355

Все характеристики

74928

P

– +

Отправить заявку

Тепловая завеса Ballu BHC-D25-W45-BS

Напряжение сети, В: 380

Артикул: НС-1050761

Тепловая мощность, кВт: 43.

9

Длина завесы, м.: 2.5

Эффективная длина струи, м.: 4

Производитель: Ballu

Вес, кг.: 85

Источник тепла: Водяные

Производительность, м.куб./час: 5600

Степень защиты, IP: 20

Потребляемая мощность двигателя, Вт: 1590

Размеры, ДхШхВ, мм: 350х500х2415

Все характеристики

Цена по запросу

– +

Отправить заявку

Тепловая завеса Тепломаш КЭВ-140П5110W

Напряжение сети, В: 220

Артикул: 135004

Тепловая мощность, кВт: 78,8

Длина завесы, м.: 1.5

Эффективная длина струи, м.: 6

Производитель: Тепломаш

Вес, кг.: 95

Источник тепла: Водяные

Производительность, м. куб./час: 7500

Степень защиты, IP: 21

Потребляемая мощность двигателя, Вт: 1950

Размеры, ДхШхВ, мм: 1520х750х535

Все характеристики

131000

P

– +

Отправить заявку

Воздушная завеса WING II W150 AC

Напряжение сети, В: 220

Артикул: 1-4-2801-0251

Тепловая мощность, кВт: 32

Длина завесы, м.: 1.5

Эффективная длина струи, м.: 3,7

Производитель: VTS Group

Вес, кг.: 29

Источник тепла: Водяные

Производительность, м.куб./час: 3100

Степень защиты, IP: 20

Потребляемая мощность двигателя, Вт: 180

Размеры, ДхШхВ, мм: 1582х465х210

Все характеристики

49816

P

– +

Отправить заявку

Тепловая завеса Тепломаш КЭВ-28П3131W

Напряжение сети, В: 220

Артикул: 133001

Тепловая мощность, кВт: 11,7

Длина завесы, м. : 1

Эффективная длина струи, м.: 3,5

Производитель: Тепломаш

Вес, кг.: 17,5

Источник тепла: Водяные

Производительность, м.куб./час: 1400

Степень защиты, IP: 21

Потребляемая мощность двигателя, Вт: 100

Размеры, ДхШхВ, мм: 1070х355х265

Все характеристики

33936

P

– +

Отправить заявку

Тепловая завеса Ballu BHC-h20W18-PS

Напряжение сети, В: 220

Артикул: НС-1116111

Тепловая мощность, кВт: 19.8

Длина завесы, м.: 1

Эффективная длина струи, м.: 4.5

Производитель: Ballu

Вес, кг.: 23.7

Источник тепла: Водяные

Производительность, м. куб./час: 2500

Степень защиты, IP: 21

Потребляемая мощность двигателя, Вт: 170

Размеры, ДхШхВ, мм: 1105х300х290

Все характеристики

Цена по запросу

– +

Отправить заявку

Тепловая завеса Ballu BHC-D22-W35-MG

Напряжение сети, В: 380

Артикул: НС-1056465

Тепловая мощность, кВт: 35.1

Длина завесы, м.: 2

Эффективная длина струи, м.: 4

Производитель: Ballu

Вес, кг.: 70

Источник тепла: Водяные

Производительность, м.куб./час: 4700

Степень защиты, IP: 20

Потребляемая мощность двигателя, Вт: 1330

Размеры, ДхШхВ, мм: 350х500х2215

Все характеристики

Цена по запросу

– +

Отправить заявку

Тепловая завеса Тепломаш КЭВ-44П4171W

Напряжение сети, В: 220

Артикул: 134018

Тепловая мощность, кВт: 19,6

Длина завесы, м. : 1

Эффективная длина струи, м.: 4,5

Производитель: Тепломаш

Вес, кг.: 39

Источник тепла: Водяные

Производительность, м.куб./час: 2500

Степень защиты, IP: 21

Потребляемая мощность двигателя, Вт: 250

Размеры, ДхШхВ, мм: 1205х580х295

Все характеристики

49664

P

– +

Отправить заявку

2–20 кэВ Рентгеновский фон неба

Реферат

НАБЛЮДЕНИЯ диффузного рентгеновского фона выше примерно 20 кэВ, сделанные с аэростатных платформ ^1–3 , указывают на спектральный индекс потока фотонов не менее 2 величины. Недавние ракетные наблюдения ^4–9 фона в полосе, простирающейся примерно до 1 кэВ, позволяют предположить, что спектральный индекс для этой полосы с более низкой энергией меньше 2 и может составлять всего 1,3. Сообщаем о результатах полета ракеты, запущенной из Уайт-Сэндс, штат Нью-Мексико, 3 марта 19 года.69, на котором мы исследовали диффузный фон неба в этой полосе с помощью широкоугольного прибора, специально предназначенного для этой цели.

Это предварительный просмотр содержимого подписки, доступ через ваше учреждение

Варианты доступа

Подписка на этот журнал

Получите 51 печатный выпуск и онлайн-доступ

199,00 € в год

всего 3,90 € за выпуск

Узнайте больше

Арендуйте или купите эту статью

Получите только эту статью столько, сколько вам нужно

$39,95

Узнать больше

Цены могут облагаться местными налогами, которые рассчитываются при оформлении заказа

Ссылки

1. Rothenflug, R., Rocchia, R., Boclet, D., и Durouchoux90, P. Space Research VII (North-Holland Publishing Co., Амстердам, 1967).

   Google Scholar

2. Агравал П. К., Аппа Рао М. В. К., Бисвас С., Гокхале Г. С., Айенгер В. С., Кунте П. К., Манчанда Р. К. и Шрикантан Б. В., Проц. Симп. № 37 IAU, Non-Solar Gamma and X-ray Astronomy , Rome, 1969 (D. Reidel Publishing, Дордрехт, Голландия, в печати).

   Google Scholar

3. Bleeker, JAM, Proc. Симп. № 37 IAU, Non-Solar Gamma and X-ray Astronomy , Rome, 1969 (D. Reidel Publishing, Дордрехт, Голландия, в печати).

   Google Scholar

4. Болдт, Э. А., Десаи, У. Д., и Холт, С. С., Астрофиз. J. , 156 , 427 (1969).

   Артикул ОБЪЯВЛЕНИЯ Google Scholar

5. Генри, Р. К., Фриц, Г., Микинс, Дж. Ф., Фридман, Х. и Байрам, Э. Т., Astrophys. Дж. Летт. , 153 , L11 (1968).

   Артикул ОБЪЯВЛЕНИЯ Google Scholar

6. Сьюард Ф. , Чодил Г., Марк Х., Свифт С. и Тур А., Astrophys. Дж. , 150 , 845 (1967).

   Артикул ОБЪЯВЛЕНИЯ Google Scholar

7. Gorenstein, P., Kellogg, E.M., and Gursky, H., Astrophys. J. , 156 , 315 (1969).

   Артикул ОБЪЯВЛЕНИЯ Google Scholar

8. Мацуока М., Ода М., Огавара Ю., Хаякава С. и Като Т., Канада. Дж. Физ. (доп.), 46 , S466 (1968).

   Артикул ОБЪЯВЛЕНИЯ Google Scholar

9. Бакстер А. Дж., Уилсон Б. Г. и Грин Д. В., Astrophys. Дж. Летт. , 155 , L145 (1969).

   Артикул ОБЪЯВЛЕНИЯ Google Scholar

10. Холт С.С., Болдт Э.А. и Серлемитсос П.Дж., Astrophys. Дж. Летт. (в печати).

11. Силк Дж. и МакКрей Р., 9 лет0039 Астрофиз. лат. , 3 , 59 (1969).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ Google Scholar

12. Болдт Э. и Серлемитсос П., Astrophys. J. , 157 , 557 (1969).

    Артикул ОБЪЯВЛЕНИЯ Google Scholar

13. Хаякава С., Proc. Симп. № 37 IAU, Non-Solar Gamma and X-ray Astronomy , Rome, 1969 (D. Reidel Publishing Co., Дордрехт, Голландия, в печати).

    Google Scholar

Download references

Author information

Authors and Affiliations

1. NASA/Goddard Space Flight Center, Greenbelt, Maryland

   E. A. BOLDT, U. D. DESAI, S. S. HOLT & P. J. SERLEMITSOS

Authors

1. Е. А. БОЛДТ

   Посмотреть публикации автора

   Вы также можете искать этого автора в PubMed Google Академия

2. U. D. DESAI

   Просмотр публикаций автора

   Вы также можете искать этого автора в PubMed Google Scholar

3. S. S. HOLT

   Просмотр публикаций автора

   Вы также можете искать этого автора в PubMed Google Scholar

4. P. J. SERLEMITSOS

   Просмотр публикаций автора

   Вы также можете искать этого автора в PubMed Google Scholar

Права и разрешения

Перепечатка и разрешения

Об этой статье

Эта статья цитируется

• Диффузный фон X и γ

  • Х. М. Хорстман
  • Г. Кавалло
  • Э. Моретти-Хорстман

  Ла-Ривиста-дель-Нуово Чименто (1975)

• Новое ракетное измерение диффузного рентгеновского фона

  • Э. Хорстман-Моретти
  • Ф. Фулиньи
  • Д. Брини

  Астрофизика и космонавтика (1974)

• Спектр диффузного космического рентгеновского фона в диапазоне энергий 2–10 кэВ

  • Д. Дж. Адамс
  • М. Дж. Рикеттс

  Астрофизика и космонавтика (1973)

• Форма диффузного космического рентгеновского спектра

  • К. С. Дайер
  • А. Р. Энгель
  • Дж. Дж. Квенби

  Астрофизика и космонавтика (1972)

• Спектр диффузного космического рентгеновского излучения в диапазоне 20–125 кэВ

  • Р. К. Манчанда
  • С. Бисвас
  • Б. В. Шрикантан

  Астрофизика и космонавтика (1972)

Комментарии

Отправляя комментарий, вы соглашаетесь соблюдать наши Условия и Правила сообщества. Если вы обнаружите что-то оскорбительное или не соответствующее нашим условиям или правилам, отметьте это как неприемлемое.

Введение в электронную микроскопию – Усовершенствованная микроскопия – Средства визуализации

Обзор

Электронные микроскопы используют электроны для освещения образца. В просвечивающей электронной микроскопии (ПЭМ) электроны проходят через образец и освещают пленку или цифровую камеру. Электронно-плотный материал в образце отбрасывает тени на лицевую сторону камеры и, таким образом, создает двумерную проекцию материала в разрезе.

Длина волны и разрешение

Разрешение в микроскопии ограничено примерно ½ длины волны источника освещения, используемого для изображения образца (см. Учебное пособие по сверхвысокому разрешению). Поскольку наши глаза могут обнаруживать только фотоны с длиной волны более ~400 нм, наилучшее разрешение, которое может быть достигнуто с помощью световых микроскопов, составляет около ~200 нм. Один из способов преодолеть дифракционный предел света — использовать источник освещения с более короткой длиной волны, чем у фотонов — электронов (см. вставку 1).

Вставка 1: Связь де Бройля

Луи де Бройль показал, что каждая частица или материя распространяется подобно волне. Длину волны частицы или вещества можно рассчитать следующим образом.

где λ — длина волны частицы, h — постоянная Планка (6,626 x 10 ^-34 Дж секунд), а p — импульс частицы. Поскольку импульс является произведением массы и скорости частицы,

Поскольку скорость электронов определяется ускоряющим напряжением или потенциалом электрона, где

Скорость электронов можно рассчитать по формуле

Следовательно, длину волны распространяющихся электронов при заданном ускоряющем напряжении можно определить по формуле

Так как масса электрона равна 9,1 x 10

-31 кг и e = 1,6 x 10

^-19 ,

Таким образом, вычисленная длина волны электронов составляет 3,88 пм при работе микроскопа при 100 кэВ, 14,74 пм при 200 кэВ и 2,24 пм при 300 кэВ.

Однако, поскольку скорости электронов в электронном микроскопе достигают примерно 70% скорости света при ускоряющем напряжении 200 кэВ, на эти электроны действуют релятивистские эффекты. Эти эффекты включают значительное сокращение длины, замедление времени и увеличение массы. Принимая во внимание эти изменения,

, где c — скорость света, которая составляет ~3 x 10 ⁸ м/с. Следовательно, длина волны при 100 кэВ, 200 кэВ и 300 кэВ в электронных микроскопах составляет 3,70 пм, 2,51 пм и 1,9 пм.18:00 соответственно.

Длина волны электронов намного меньше, чем у фотонов (2,5 пм при 200 кэВ). Таким образом, разрешение электронного микроскопа теоретически не ограничено для визуализации клеточной структуры или белков. Практически разрешение ограничено ~ 0,1 нм из-за системы линз объектива в электронных микроскопах. Таким образом, электронная микроскопия может разрешить субклеточные структуры, которые невозможно визуализировать с помощью стандартной флуоресцентной микроскопии, такие как микроворсинки кишечных клеток или внутреннюю структуру бактерии (рис. 1).

Рисунок 1: бактерий E. coli , перевариваемых в кишечнике нематоды, C. elegans . Микроворсинки кишечных клеток выступают в просвет кишки; бактерии поселяются в просвете. Поперечное сечение E. coli составляет около 400 нм. (фото Shigeki Watanabe и Erik Jorgensen)

Электронные микроскопы могут даже определить молекулярную структуру клетки, например, диаметр плазматической мембраны составляет всего около 5 нм. Мембрана состоит из двойного липидного слоя, каждый слой имеет толщину в одну молекулу. Эти жирные кислоты имеют длину около 20 атомов углерода с гидрофильной головной группой. Эти отдельные липидные слои можно различить на электронной микрофотографии (рис. 2).

Рисунок 2: Нервно-мышечное соединение в C. elegans . Липидный бислой плазматической мембраны менее 5 нм, но отдельные листочки двойного слоя могут быть разрешены. (фото Шигеки Ватанабе и Эрик Йоргенсен)

Фиксация

Для просвечивающей электронной микроскопии через образец пропускают пучок электронов. Поскольку электронные микроскопы работают в вакууме, образцы необходимо обезвоживать. Чтобы избежать изменений в тканях, вызванных обезвоживанием (например, изюм из винограда), ткань должна быть сшита или «фиксирована» для сохранения структуры. Фиксаторы, обычно используемые в электронной микроскопии, включают глутаровый альдегид или четырехокись осмия. Традиционно фиксацию проводят на льду, поскольку в иммобилизованных и неактивных образцах ткани лучше сохраняются.

Замораживание под высоким давлением

Обычная химическая фиксация часто приводит к таким артефактам, как усадка, деформация мембраны и агрегация белков. Быстрое замораживание является широко используемым методом мгновенной остановки клеточного метаболизма и активности и позволяет избежать некоторых артефактов, наблюдаемых при использовании ледяных фиксаторов. Однако замораживание образцов приводит к появлению новых артефактов, поскольку вода в клетках кристаллизуется во время этого процесса. Лед расширяется и разрывает мембраны. Во избежание образования кристаллов льда образцы можно замораживать под высоким давлением (~2000 бар). Такие образцы обладают отличной сохранностью (рис. 3).

Рисунок 3: Вентральный нервный тяж C. elegans , показывающий различия между обычной химической фиксацией и замораживанием под высоким давлением.

Обычно, когда жидкая вода охлаждается до температуры замерзания, молекулы воды начинают образовывать лед на затравочном кристалле или какой-либо другой зародышевой структуре (рис. 4В). Поскольку вода при кристаллизации расширяется, она может разрушить клеточные мембраны (рис. 4Е). В отсутствие места зародышеобразования переохлажденная вода может оставаться в жидкой фазе (рис. 4С). В конце концов, жидкость достигнет состояния гомогенного зародышеобразования и кристаллизуется в отсутствие зародыша. Температура, при которой происходит гомогенное зародышеобразование воды, составляет около -40ºC. Если может быть достигнута скорость замерзания 10 000ºC/с, переохлажденная вода может быть застеклована без кристаллизации, то есть вода замерзнет в неупорядоченном состоянии (рис. 4C). Жидкий азот может генерировать скорость охлаждения до -16 000ºC/с. Однако из-за плохой теплопроводности воды скорость замораживания тканей глубиной 10 мкм очень низкая, поэтому толстые образцы (> 10 мкм) не могут быть заморожены без кристаллов льда. Однако при 2100 бар (1 бар = атмосферное давление на уровне моря) воду можно переохладить до -90ºС. В этих условиях скорость замерзания 200ºC/с достаточна для стеклования воды. Таким образом, несмотря на плохую теплопроводность воды, биологические ткани толщиной до 500 мкм могут быть заморожены без кристаллов льда (рис. 4F). Интактных животных, таких как C. elegans и личинок дрозофилы , а также срезы тканей можно заморозить и сохранить для электронной микроскопии.

Рисунок 4: Кристаллизация и витрификация воды. (А) Молекулы воды очень подвижны в жидкости. (B) Когда температура достигает 0ºC, вода начинает кристаллизоваться, если есть затравка. (C) Вода может быть переохлаждена до -40ºC при атмосферном давлении. (D) Вода в клетке также очень подвижна, несмотря на присутствие молекул в цитозоле. (E) Кристаллы льда могут разрушать клеточную мембрану, а также смещать молекулы и клеточные структуры. (F) При замораживании под высоким давлением вода витрифицируется, тем самым сохраняя нативное состояние клетки.

Срезы

После фиксации образец помещают в пластик и делают тонкие срезы алмазным ножом с помощью микротома (рис. 5). Поскольку электроны должны пройти через образец для формирования изображения, ткани должны быть разрезаны на срезы размером 30–80 нм для визуализации с помощью ПЭМ. Микротом перемещает образец по неподвижному алмазному ножу с нанометровой точностью, используя тепловое расширение металлов. Качество срезов зависит от трех факторов: окружающей среды, закладного пластика и ножа. Микротом должен находиться в помещении, где нет вибрации и температурных колебаний. Толщина секций может быть легко изменена вибрацией или изменением температуры. Пластик, в который залиты образцы, также может повлиять на качество среза. В продаже имеется несколько типов пластмасс, и они представляют собой пластмассы на основе эпоксидной смолы (Araldite, Durcupan, Epon и Spurr) или на акриловой основе (LR white, метакрилаты и Lowicryl). Эпоксидные смолы полимеризуются с использованием катализатора и высокой температуры. Преимущество смол на основе эпоксидной смолы заключается в том, что они сшиваются с тканями и хорошо образуют ленты. С другой стороны, они очень гидрофобны и поэтому не подходят для иммуноцитохимии. Акриловые смолы полимеризуются с использованием УФ-излучения, катализатора или высокой температуры. Свойства акриловых смол противоположны эпоксидным смолам: поскольку ткань не сшивается со смолой, участки часто «выпадают», гигроскопичность может привести к расширению и плохому формированию ленты. С другой стороны, гидрофильная природа делает эти причины подходящими для иммуноцитохимии. Таким образом, в зависимости от применения можно использовать другой тип смолы. Наконец, острый нож необходим для хорошего качества резки. В продаже имеются ножи трех типов: стеклянные (наименее дорогие), сапфировые и алмазные (самые дорогие). Все эти ножи можно использовать для ультратонких срезов. Однако прочность лезвия алмазного ножа самая высокая, благодаря чему многие срезы можно разрезать с одинаковым качеством. Выбор ножа будет зависеть от бюджета и потребностей в использовании.

Рисунок 5: Последовательность подготовки образца для ПЭМ.

Визуализация

Как можно использовать электрон для визуализации структуры? Электроны являются отрицательно заряженными частицами и отталкиваются электронами, окружающими ядра атомов. Это взаимодействие заставляет распространяющиеся электроны рассеиваться. Таким образом, контраст может создаваться электронно-плотными материалами на пути электронного луча. На рассеяние в просвечивающей электронной микроскопии влияют два фактора: толщина образца и атомный номер контрастирующего вещества (рис. 6).

Глубина проникновения электронов зависит от толщины сечения образца. Применяя движущую силу высокого напряжения, электроны будут проникать через участки ткани с очень небольшим рассеиванием. Обычно ~ 100–150 нм — это самый толстый образец, который можно наблюдать при ускоряющем напряжении 100 кэВ.

Рис. 6: Генерация контраста при ПЭМ-изображении

Генерация контраста зависит от атомного числа атомов. Атомы с большим атомным номером имеют больше электронов вокруг своего ядра, и поэтому больше падающих электронов будет рассеиваться (рис. 6). К сожалению, биологические образцы не создают большого контраста, поскольку обычно состоят из углерода, азота и кислорода — атомов с одинаковым атомным номером. Таким образом, ткани окрашиваются тяжелыми металлами, такими как осмий, уран или свинец. Например, осмий предпочтительно связывается с ненасыщенной связью в липидных бислоях и сшивает ее с соседним липидом, поэтому осмий используется для усиления контраста мембран.

Визуализация белков

Проблема с электронной микроскопией заключается в том, что она не очень хорошо подходит для идентификации белков в срезах. Иммуно-электронная микроскопия затруднена (рис. 7), а морфология нарушена. Разрабатываются новые методы, сочетающие флуоресцентную микроскопию сверхвысокого разрешения и электронную микроскопию (рис. 8).

Рисунок 7: Иммуно-электронная микроскопия. Умеренные фиксации могут сохранять антигенность белков во время фиксации и встраивания. На пластиковый срез наносят первичное антитело против интересующего белка, а затем вторичное антитело, конъюгированное с частицей золота. Золотая частица является электронной плотной и выглядит как отчетливая точка на микрофотографии. Однако необходимость сохранения морфологии ткани ограничивает использование мягких фиксаторов для любого препарата ЭМ. Таким образом, антитела, которые хорошо работают для флуоресцентной микроскопии или вестерн-блоттинга, часто не работают на пластиковых срезах, вероятно, из-за более жесткой фиксации и пластиковой матрицы (1). Более того, каждое антитело составляет ~19нм в длину, и, таким образом, золотая частица будет смещена от белка не более чем на две длины антитела (2).