Галан отопление отзывы: Отзывы об электродных электрических котлах Галан

Чтобы повысить теплообразование, можно растворить в теплоносителе пищевую соду.

Отзывы потребителей

Некоторые покупатели встраивали электродный котел в уже действующую старую систему, заливая обычную подсоленую воду. Но соль действует разрушительно на металлические детали, отчего начиналась коррозия, что негативно сказывалось на работоспособности системы и приходилось разбирать и чистить электроды и промывать трубы.

Вот другой опыт:

«Когда подсчитывали затраты на новую систему отопления не учли тот факт, что нужна специальная вода для заполнения труб, со своим показателем электропроводности.

«Котел подключается через автоматы на 50(!) Ампер, у моих знакомых деревянный дом сгорел раньше, чем они сработали».

Схема подключения котла

«Приятно устанавливать именно такой котел, так как он маленький и легкий, просто вешается на стену и все, не нужно никакого фундамента, дымовой трубы и прочего. А систему из пластиковых труб я спаял сам».

«Отапливаю дачу в зимний период электродным котлом и не жалею, что выбрал именно такой. Нет никакой накипи. Я спокоен, ведь даже если вдруг вытечет весь теплоноситель, котел просто остановится и даже не испортится».

«У нас небольшой дом отдельной кочегарки нет, поэтому использование именно «Галана» было для нас оправданным, потому как он очень маленький – не сразу заметишь его на трубах отопления».

Отопление пеллетами не только экономит средства, но и защищает окружающую среду, ведь пеллеты – это вторсырье. Пеллетный котел своими руками – устройство, изготовление и монтаж, читайте внимательно.

Инструкцию по изготовлению пиролизного котла своими руками вы найдете здесь.

Для того чтобы диагностировать исправность отопительного котла, необязательно постоянно находиться рядом с ним. Группа безопасности котла отслеживает процесс горения в автоматическом режиме. По ссылке https://microklimat.pro/otopitelnoe-oborudovanie/kotly/gruppa-bezopasnosti.html подробная информация о данном приборе и советы по выбору.

Заключение

В общую систему заливают обычную воду или антифриз, а в малый контур котла используют, рекомендованную заводом-изготовителем, технологическую жидкость.

Можно заключить, что если соблюдать все рекомендации во время установки и в процессе эксплуатации — этот вид отопления является надежным, безопасным и не требует особого внимания. А если, в первую очередь, интересует дешевый вид топлива, то электричество – не вариант.

Котлы настенного типа компактны и удобны, к тому же выглядят современно. Как выбрать настенный газовый котел и какие параметры необходимо учитывать, расскажем подробно.

О преимуществах двухконтурных газовых отопительных котлов поговорим в этой статье.

Видео на тему

Электрический отопительный котел Галан, электрокотлы в Екатеринбурге, котлы для отопления дома

Любая отопительная система основана на одном крайне важном элементе – котле. Именно в котле нагревается, а потом циркулирует по системе вода. А так как этот элемент как сердце в организме человека, подходить к выбору котла нужно внимательно и осторожно. Один из наиболее популярных котлов на текущий момент является котел электрический.

Электрические котлы отопления могут применяться в абсолютно разных помещениях, как в многоэтажных квартирных домах и загородных коттеджей, так и в промышленных, торговых и общественных местах. Уровень теплоотдачи у электрических котлов высокий, такие котлы не требуют сложного монтажа и достаточно экономичны в потреблении электроэнергии.

Электрические котлы для отопления дома Галан эффективны, просты в эксплуатации, при этом надежны и экологически безопасны. Всегда приятней иметь собственную печь под боком, чем ждать начала отопительного сезона или устранение аварий на центральных магистралях. Электрические котлы для дачи Галан более удобны в эксплуатации, чем обычные каменные печи. При установке автоматического управления, не придется «стучать зубами» приезжая на дачу в ожидании, когда печь прогреет помещение. Электрический отопительный котел это сделает за Вас в нужное время.

Отопительные электрические котлы можно купить в нашей компании, официальном представителе фирмы «Галан» в Екатеринбурге и УрФО. Все электрические котлы Галан имеют международные и российские сертификаты качества, большой гарантийный срок. Электрический энергосберегающий котел экономичен как по своей стоимости, так и по стоимости отопления 1м

Цены электрических котлов Галан демократичны, за счет использования современных высококачественных материалов и новейших разработок, продукция фирмы «Галан» может конкурировать и с западными компаниями. Котел электрический в Екатеринбурге можно купить у дилеров фирмы «Галан», которые также могут оказать услуги по монтажу оборудования и сервисного ремонта.

Выбирая электрические котлы Галан, Вы навсегда забудете о холодных вечера в квартире и на даче, в гараже и на предприятии. К тому же электрические отопительные котлы можно использовать не только как основные источники тепла, но и как дополнительные, резервные.

электрические котлы – отопление дома, дачи, склада

Главная особенность электродных котлов «ГАЛАН»,    в отличие от ТЭНовых котлов любых производителей , как отечественных, так и импортных, состоит в  том,  что  коэффициент преобразования энергии СОР  ( Coefficient of Performance), также  называемый  тепловым коэффициентом , у электродного котла «ГАЛАН» составляет от 1,48 до 2,16 в зависимости от модели и условий эксплуатации. У ТЭНовых котлов он не превышает 0,98

• Важнейшее преимущество №1: Возможность существенно ( от 40% ) экономить на ежемесячной оплате электроэнергии за работу электроотопления в случае использования электродного котла «Галан», в отличие от затрат на отопление любым электрическим котлом другого типа.
• Важнейшее преимущество №2: Возможность меньшей мощностью отопить больший объем помещения , если Вы ограничены по вводной мощности на помещение.
• Важнейшее преимущество №3: Стоимость электрода / блока электродов ниже стоимости аналогичных по мощности ТЭНа / блока ТЭНов. С учетом же существенно более низких эксплуатационных расходов (ежемесячной платы за электричество) совокупная стоимость владения электродным котлом «Галан» значительно ниже стоимости владения любого ТЭНового котла любого производителя.

Глава государства подписал Указ, который должен стимулировать потребление в Беларуси электрической энергии. С 1 января 2019 года для нужд отопления и горячего водоснабжения она станет в 3 раза дешевле.
Как сообщила пресс-служба Министерства антимонопольного регулирования и торговли, Указ №492 «Об установлении тарифов на жилищно-коммунальные услуги для населения на 2019 год», вступает в силу с 1 января 2019 года. Часть положений указа касается увеличения тарифов на основные жилищно-коммунальные услуги для населения, а другая – снижения.

С 1 января 2019 года стоимость электричества для нужд отопления и горячего водоснабжения для домов, которые не подключены к центральному отоплению и газоснабжению, установлена в размере 0,0335 рубля за 1 кВт·ч. Отопительные приборы нужно будет оборудовать отдельным счетчиком.

Новое в законодательстве: использование электрической энергии для нужд отопления и горячего водоснабжения-пошаговые действия (…)

Электродный котёл Галан – принцип работы и цена на различные модели производителя

Современные владельцы недвижимости ответственно подходят к вопросу организации процесса отопления дома, обращая внимание на энергоэффективные, экономичные и безопасные котлы. Чтобы удовлетворить спрос на данную категорию товаров российский производитель «Галан» разработал инновационный электродный котел, характеризующийся максимальными показателями КПД и минимальным уровнем потребления энергоресурсов.

Этот прибор имеет ряд конкурентных преимуществ и может быть адаптирован под нужды отопительного контура частного дома, коммерческого здания или жилой квартиры. Выбирая для контура электродный котёл Галан принцип работы цена и особенности конструкции которого будут рассмотрены в данном обзоре, потребитель сможет добиться существенной экономии денег и обеспечить дом надежным и долговечным источником тепла.

Особенности работы котла

Поскольку электродный электрокотел появился на рынке отопительной техники сравнительно недавно, принцип его работы пока не знаком широкому кругу потребителей, привыкших использовать для обогрева дома традиционные ТЭНовые отопители. Если вы не можете определиться с выбором электрического котла в дом, то наша статья «Как выбрать электрокотел для отопления частного дома?» будет полезной.

В своей основе электродные электрические котлы отопления содержат специальный блок из электродов, который способствует ионизации теплоносителя.

Во время этого процесса выделяется тепло, которое передается жидкости, циркулирующей между теплообменными поверхностями. Отсутствие дополнительных узлов, задействованных в процессе подогрева теплоносителя, позволило разработчикам добиться предельно высокого значения КПД. Кроме этого, котел электрический проточный, оснащенный электродным блоком имеет и ряд других особенностей.

Особенности электродного котла:

• компактный корпус;
• бесшумная работа;
• долгий срок эксплуатации;
• устойчивость к коррозии и протечкам;
• соответствие самым строгим требованиям ТБ;
• моментальный нагрев воды;
• высокий уровень ремонтопригодности, обусловленный наличием разборного корпуса;
• возможность замены износившегося блока электродов;
• доступная стоимость установки, которая характеризуется минимальной трудоемкостью и высокой скоростью монтажных работ.

Модельный ряд

Разрабатывая электрокотлы Галан отзывы о которых можно найти на официальном сайте производителя, инженеры компании ориентируются на спрос, поэтому в линейке товаров можно найти несколько серий продукции с наиболее востребованными типами электродных отопителей. Каждая серия продукции имеет свою специфику и отличается по мощности и функциональности.

В настоящий момент в линейке бренда можно встретить электродные котлы из следующих серий:

1. Гейзер.
2. Вулкан.
3. Очаг.

По критерию мощности выигрывают котлы из серии «Вулкан» — они могут использоваться для обогрева помещений большой площади (от 250 до 500 квадратов). Им уступают котлы под маркировкой «Гейзер», мощностью от 9 до 15 кВт. Самые простые устройства – это котлы из серии «Очаг». Они обладают мощностью от 2 до 6 кВт и могут использоваться для обогрева небольших домов и малогабаритных квартир.

Стоит отметить, что мощность прибора не оказывает особого влияния на его внешний вид и конструкцию. Даже самый мощный электрокотел Галан купить который можно у официального поставщика, будет обладать аккуратным компактным корпусом, привлекательным внешним видом и небольшим весом.

Ценовая политика бренда

Бренд работает на территории России, поэтому у отечественных потребителей есть возможность по демократичной цене купить электрокотел Галан отзывы о котором носят в основном положительный характер. Стоимость прибора напрямую связана с его мощностью и функциональностью. В частности, цена базовой модели мощностью 2 кВт из серии «Очаг» составляет около 60 долларов. Котлы из серий «Гейзер» и «Вулкан» обойдутся потребителям несколько дороже – их ориентировочная стоимость составляет 250 и 500 долларов для моделей мощностью 9 и 50 кВт соответственно. Более детально про электрическое отопление можно прочитать здесь.

В линейке российского бренда «Галан» можно подобрать оптимальный вариант электродного котла для обогрева здания любой площади.

Окончательный выбор

Вне зависимости от принадлежности котла к определенной серии продукции, он будет соответствовать высоким стандартам качества, и отличаться достойным качеством сборки, длительным сроком эксплуатации и превосходными потребительскими характеристиками. На все котлы отопления электрические проточные производитель предоставляет гарантию, поэтому потребитель может быть уверен в защите своих прав.

Электрический котел Галан Гейзер К 6

Описание Галан Гейзер К 6

Электрический настенный котел Галан Гейзер К 6 артикул мощностью 6 кВт – это современный экологичный источник тепла. В качестве нагревательного элемента в таких котлах используют ТЭНы. Количество их может варьироваться. В данной модели их .

Котел Галан Гейзер К 6 предназначен для отопления загородных домов, дач, квартир и других помещений. Электрокотел – это лучшее решение для отопления, если невозможно подвести газ. Кроме того, такой котел используют в качестве вспомогательного (в комбинации с твердотопливным) или резервного (на случай аварии основного) источника тепла.

Применение электрического котла Гейзер К 6

Электрокотел Гейзер К 6 способен обогреть до 60 м2. У одноконтурных моделей возможно присоединение внешнего бойлера для приготовления горячей воды. В двухконтурных агрегатах предусмотрена возможность нагрева воды без дополнительного оборудования, по проточному принципу. Данный котел одноконтурный.

Котлы Галан (Россия) – безопасны, их можно присоединить к любой схеме центрального или этажного отопления. Гарантия производителя 24 месяца(ев).

Преимущества электро котла Галан Гейзер К 6

• Простота и удобство монтажа без специальных разрешений и согласований;
• Тихая бесшумная работа;
• Компактность. Габаритные размеры котла Гейзер К 6: х315х мм при весе 1.65 кг;
• 1 ступени регулировки мощности;
• стальной теплообменник.

Температура воды в системе регулируется: 95 градусов. механическое управление и позволяют четко регулировать работу агрегата. Также котел оснащен .

Перед покупкой важно знать такие технические характеристики как:

• Напряжение однофазное;
• Выход под отопление 1 дюймов.

Помните, от правильного выбора нагревательного котла зависит насколько теплым и комфортным будет Ваш дом, безопасность системы в целом и затраты на ее обслуживание. Сократить расходы на электричество поможет не только грамотно выбранная автоматика, но хорошее утепление дома.

Обратите внимание на наличие/отсутствие следующих элементов в данной модели котла:

Встроенный циркуляционный насос – нет

Встроенный расширительный бак – нет

Электрокотел электродный для отопления

При выборе системы отопления большинство отдают предпочтение газовому отоплению. Но не у всех есть возможность подключения газа в своей местности. Поэтому альтернативным вариантом является отопление электрическим котлом отопления. Рассмотрим в нашей статье электродные электрические котлы.

Содержание:

1. Характеристики электродных котлов
2. Преимущества электродных котлов
3. Минусы электродных котлов
4. Монтаж электродных котлов
5. Принцип работы электродного котла
6. Экономичны ли электродные котлы
7. Электродные котлы «Галан»

Характеристики электродных котлов

Электродные котлы отопления работают по принципу прямого нагрева, то есть тепло передается сразу к энергоносителю. Таким образом, мощность оборудования увеличивается. В емкость с носителем тепла опускаются электроды, благодаря которым происходит нагрев. С частотой в 50 Герц ток проводится через воду, поэтому невозможно появление электролиза. Следовательно, не будет образовываться накипь на внутренней части котла. Из-за сопротивления нагревается теплоноситель. Благодаря быстрому нагреву можно приобрести бак небольшого объема.

Особенности электродных котлов помогают снизить затраты на систему отопления.

Электродный котел по сравнению с обычным электрическим котлом потребляет на 40% меньше электроэнергии. Такая особенность является главным преимуществом данного оборудования. В работе такого котла нельзя использовать воду без специальной водоподготовки. Рекомендуется применять в качестве теплоносителя антифриз.

В электродных котлах со временем растворяются электроды.

Преимущества электродных котлов

Использовать такой котел можно, если в вашей местности стабильная сеть и в доме надежная электропроводка. Если у вас часто отключают электричество, то устанавливать электродный котел не рекомендуется. Но можно приобрести ИБП и в таком случае получится сгладить перепады и частые отключения сети. Но такой прибор можно работать лишь несколько часов. Напряжение может регулироваться за счет встроенного стабилизатора в ИБП.

В некоторых районах есть квота на обогрев дома электричеством. В другом случае придется получить разрешение.

Если у вас нет проблем с подачей электроэнергии, то вы сможете оценить все плюсы электродного котла:

1. Небольшие размеры котла и возможность установки в систему, которая работает на газе. Если прекратилась подача газа, то включается электродный котел.
2. Безопасность оборудования. Не может быть утечка электрического тока благодаря высокой безопасности котла. Можно использовать оборудование для поддержания минимальной температуры без наблюдения.
3. Можно установить котел в жилом помещении без оборудования котельной, а также дымохода. Установить такой котел можно даже самостоятельно.
4. Заменить нагревательные элементы можно без смены всего оборудования.
5. Бесшумная работа.
6. КПД 96%. Экономия при нагреве до 40% электроэнергии.

Минусы электродных котлов

Самым главным минусом электрических котлов является высокая стоимость электроэнергии. Но если отапливать дачный дом, то такая система вполне себя оправдывает. Если совмещать электродный котел с некоторыми батареями и трубами, то результат вас огорчит. При использовании чугунных батарей, которые имеют большой объем воды. Следовательно, котел должен нагревать большое количество теплоносителя. Кроме этого не рекомендуется использовать металлопластиковые трубы. Лучше отдать предпочтение полипропиленовым элементам.

Для работы котла требуется поддержание постоянного сопротивления носителя тепла. Для регулирования применяются специальные добавки для предотвращения образования накипи.

Монтаж электродного котла

Для установки электродного котла необходимо заранее приобрести воздухоотводчики, которые работают автоматически, манометр и предохранительный клапан. Возле расширительного бака следует установить запорную арматуру.

Котел должен быть установлен вертикально. Обычно в комплекте есть специальное крепления для котла. Первые 1,2 м трубы должны быть металлическими, а остальные, изготовленные из других материалов.

Установить датчики и системы терморегуляторов лучше специалистам. Перед монтажом котла требуется промыть систему отопления со специальными добавками, которые указываются в паспорте оборудования. При плохой очистке может снизиться эффективность работы котла. Производители рекомендуют использовать в качестве теплоносителя дистиллированную воду.

Для данной системы необходимо выбрать радиаторы в зависимости от объема всех труб и радиаторов. Оптимальным является 8 литров на 1 кВт мощности оборудования. Если показатель выше, то котел будет затрачивать больше времени на работу.

Рекомендуется использовать биметаллические или алюминиевые радиаторы для системы с электродным котлом. Нельзя применять чугунные радиаторы из-за большого количества примесей в носителе тепла, которые отрицательно влияют на работу котла отопления.  

Электродные отопительные котлы являются энергосберегающими надежными приборами, которые имеют множество преимуществ. Самое главное в загородном доме это тепло и в помещениях и экономный расход энергоносителя.

Принцип работы электродного котла

Электродные котлы имеют открытые электроды, на которые поступает ток от сети с частотой 50 Гц. Вода, в которой находятся электроды, имеет химический состав. После получения разницы потенциалов в электролите ионы начинают двигаться. Движение заряженных частиц хаотичное из-за постоянной смены потенциалов. Теплоноситель нагревается из-за движения ионов, которые выделяют тепло.

Экономичны ли электродные котлы

Производители электродных котлов уверяют в том, что они экономичнее на 30% ТЭНовых. Но другие говорят, что котел мощностью 6 кВт, будет потреблять именно 6 кВт. Но те, кто установил в доме электродный котел, отмечают меньшее потребление электроэнергии. Негативно высказываются об экономии такого котла только теоретики, которые используются ТЭновые агрегаты. Если посмотреть различные форумы, то нельзя найти ни одного плохо отзыва от владельца электродного котла.

Уменьшение мощности оборудование возможно по причине исхода срока годности электродов, которые нужно своевременно менять. В другом случае проблема может быть связана с автоматикой. Рекомендуется обратиться в сервисный центр для устранения причины.

Преимуществом для водяной системы отопления с использованием электродного котла является передача энергии сразу к теплоносителю. Такой показатель очень важен как во время старта, так и для поддержания необходимой температуры. При снижении температуры система автоматически включается. Теплоноситель нагревается моментально без каких-либо задержек.

Если отключается электроэнергия, то нагрев тоже прекращается. Температура держится стабильно, а энергия не расходуется вхолостую. Но для этого требуется установка качественной дорогой автоматики.

Электродные и индукционные котлы чаще используются для системы «Теплый пол», так как имеют небольшие габариты в отличие от ТЭновых агрегатов. Такие котлы точно поддерживают температуру и оснащены хорошей автоматикой. Многоступенчатые ТЭНовые котлы могут регулировать мощность со скачкообразным включением и выключением нагревательных элементов. Для устройства теплых полов лучше отдать предпочтение электродным котлам. Индукционные котлы тоже будут эффективно работать, но их стоимость намного выше.

К преимуществам электродных котлов можно еще добавить низкую стоимость, бесшумность при работе, небольшие размеры. Но к такому оборудованию требуется провести отдельную линию питания и контур заземления. На это, конечно же, потребуется дополнительные затраты.

На выше представленной диаграмме можно увидеть зависимость расхода электроэнергии от погоды на улице в разные месяцы отопительного сезона.

Дать заключение о том, эффективны электродные котлы или нет нельзя. Есть как положительные, так и отрицательные стороны. В нашей статье можно узнать обо всех особенностях оборудования и отдать предпочтение нужному котлу.

Электродные котлы «Галан»

Данный производитель выпускает электродные и ТЭНовые нагреватели. Но фирма больше отдает предпочтение изготовлению электродным котлам отопления. Оборудование выпускается проточного типа. Установить такой котел можно без согласований в различных организациях. Электродный котел «Галан» можно применять вместе с другим котлом.

На официальном сайте компании можно найти информацию о стоимости и характеристиках отопительного оборудования. Но кроме самой стоимости оборудования следует добавить приобретение автоматики (50-100$), датчики (каждый около 15$) и циркуляционный насос.

Для отопления дачного дома можно выбрать котел «Галан Очаг 3». А также такой вариант подходит для обогрева небольшой квартиры. Мощность котла может быть 2 и 3 кВт. Меньшей мощности оборудование вряд ли получиться найти. Все отзывы о производителе «Галан» только положительные. Но для нормальной эксплуатации следует учитывать правила установки и подготовки отопительной системы: проверять воду, заливать специальный раствор этой же фирмы. Стоит помнить о том, что для эффективной работы оборудование нужно правильно выбрать автоматику. На сайте можно увидеть такую запись: «За работу котлов с не рекомендованной автоматики ответственности не несем».

Галан выпускает не только электродные, но и ТЭНовые котлы.

Можно найти самое большое количество отзывов от «Галан «Гейзер 9». Можно отметить некоторые факты потребления котлом электроэнергии:

1. В Харькове до 135 кв.м. обогревается «Галан Гейзер 15». За весь отопительный сезон было потрачено 2750 кВт.
2. В Днепропетровской области дом 120 кв.м. обогревается «Галан Очаг 5», но владелец отмечает, что нужно было приобрести «Очаг 6».
3. Дом в Энергодаре 150 кв.м. отапливается «Галан Гейзер 15» и за весь сезон при морозах до 15 градусов в месяц на счетчике было 1300 кВт.

В отзывах, конечно, не указаны материал стен, качество отопления и другие особенности, но некоторые выводы сделать можно. Но почти все владельцы указывали на то, что необходимо следить за жидкостью, которую заливаете в систему. Котел можно полностью перестать работать из-за того, что была залита обычная вода из крана. Даже если промыть систему и прочистить электроды, теплоноситель не будет нагреваться выше 35 градусов. В таком случае придется купить новые электроды и жидкость для такой системы.

Электродные котлы легко установить. Они не требовательны к эксплуатации, но следует соблюдать параметры носителя тепла и качественную автоматику.

Читайте также:

Отзывы | Energosberezhenie.com

Отзывы наших клиентов

Re: Re: (“ION”).

Займаюсь реконструкцю молочно-товарних ферм. По технолог вода в полках зимою повинна бути +15-17 градусв.В першому корвнику був поставлений проточний теновий водонагрвач.з-за жорсткост води тени виходили з ладу через мсяць-пвтора, а це 1250 грн.
В слдуючому корвнику був поставлений  росйського виробництва Галан 3/9квт.
А дальше ми вийшли на втчизняного виробника СПД Назаренко Ю.П. на нш примщення закупили десяток котлв 3/9квт, як працюють без збою вже шостий рк, по одному разу чистили електроди все няких бльше турбот не ма. Цна на котли триматься однакова вже 5 рокв, досить, що вони дешевш вд росйських в 2 рази. А працють в нас в систем комбнованих бойлерв обмом 200л, так що не ма потреби включати обгрв бойлера, котел сам справляться з роботою.
Дуже класн котли, рекомендую купл яти ц котли, Тим бльш з подорожчанням газу, це велика альтернатива.

Re: Re: (“ION”).

Максим  Днепр. Поставил “ION” два года назад в старую систему  с чугунными батареями. Первую  зиму  матюкался , температура выше 18 в доме не поднималась и это при том , что сам котел горячий рукой не удержишь. Долго искал причину и посоветовали умные люди поставить панельные стальные батареи. Весной вооружился болгаркой и срезал все под корень. Когда разрезал одну чугунную секцию , то был просто в шоке 70% в нем было забито какой то ржавчиной , пришлось раскручивать и вымывать котел. когда раскрутил котел очень удивился , там действительно нечему ломаться , зачистил электрод наждачкой до метала. Спаял систему сам из полипропиленовой трубы и поставил стальные батареи КОРАДО , насос ГРЮНДФОС , расширительный бак , группу безопасности, и фильтр. Запускал систему сам , все делал по инструкции. Воды в системе получилось в три раза меньше. Через десять минут моя система нагрелась до 70 градусов. Очень гордился своей работой , у меня теперь в доме африка. Следующая зима кардинально отличалась от первой , дополнительно приобрел програматор АУРАТОН 2005 , выставил комнатную температуру 22 градуса на день , а ночью понижаю на 2 градуса . Когда посчитал свои расходы за вторую зиму , вот что получилось- дом 53,2 м. кв. – котел “ION”1/3 – СРЕДНЕЕ ВРЕМЯ РАБОТЫ КОТЛА В СУТКИ- 6 часов х 3 =18 кВт.час х 33 копейки = 5,94 грн. х30 дней = 178, 2 грн. На следующую зиму планирую поменять счетчик на трехтарифный и установить теплаккумуляторный бак и отапливать дом ночью , а днем  будет дом греться из бака. Думаю на этом сэкономить около 30%

Re: Re: “ION”.

Добжа Сергй Вкторович  Працює котел вже 3 роки без проблем. Максимальна плата 75 гривень, мнмум 24 це за однокмнатну квартиру. Велик проблеми були з дозволом, ще мусив протягнути окремий кабель вд пдстанц до квартирице ще 90 менрв серйозних проблем грошей.Зробив зразу на дв квартири пополам вийшло кожному приблизно 15 000 гривень, Котли на 3 кловата в кожнй квартир, будуть питання пишть допоможу чим зможу Сергй,

Re: Re: “ION”.

роман. Установил в цехе котёл “ION”3/6 ,уже десять  месяцев назад.Подтолкнуло на этот шаг отсутствие газа.Искал,что-то экономичное и простое.Почитал тут отзывы,литературу и решился.Добавил к системе электронный терморегулятор с датчиками.И вот по истечению сезона  делаю вывод:”ЭТО ТЕМА”!!!!!!
Работает всё просто отлично!Я даже больше,чем просто доволен!Знакомые и друзья смотрят и только удивляются.В помещении тепло,а компактность и простота системы,- в голове не укладывается…Привыкли ко всему громоздкому-типа надёжному СССР-овскому!
Вобщем берите – не прогадаете!

Re: Re: “ION”.

Сергей из Полтавы .До монтажа  “ION” у меня в отопительной  системе ТЕНовик  практически не выключался и молотил круглые сутки ( и это при том, что мощность у него была больше). При -22градусов за бортом наблюдаю расклад: 18-20мин. работает, 40 мин. курит.Народ, я не спец я просто смотрю в “платежки” и они меня сегодня радуют!

Re: Re: “ION”.

Владислав г.Харьков. Приобрел котел “ION” 5 кВт. Отличное качество, работает 1,5 года без сбоев. Цена и качество – устраивает. Спасибо!

Re: Re: “ION”.

Директор КМБ “Фортуна” г. Каменец Подольский.  Купили 6 штук “ION” 3/30 для офисного помещения подключили паралельно , сделали миникотельную. Поставили автоматику . за зимний сезон реально заплатили в два раза меньше за отопление , чем год назад . раньше было центральное отопление

Re: Re: “ION”.

Микола Сотниченко м. Рівне Займаюся опаленням більше пятнадцяти років , монтував різні котли и газові і електричні і твердопаливні.  Ідеальних котлів не існує взагалі , у кожного є свої плюси і мінуси .  “ION” встановлюю людям вже три роки , раніше ставив російський “ГАЛАН” , але він і дорощий і працює тікі на їх теплоносію , якщо обирати серед надійних і економічних то у цього котла конкурентів немає , а враховуючи його ціну можна зрозуміти , чому на них такий попит. Єдиний мінус , треба трохи погратися з водичкою , але взагалі нічого складного , робиш все по інструкції і ніяких проблем , я зараз монтую в систему амперметра і замовники завжди бачать як їх котел працює. Сам процес водопідготовки зараз у мене займае десь дві – три години .  За сезон встановив їх двадцять вісім штук. Один раз  була проблема з батареями з алюмінію , що я тікі не робив , не міг підняти ампераж. Промучився два дні , дзвонив на фірму , а для алюмінію не можна додавати соду. Купив у них порошок для алюмінію , зараз додаю його , якщо в системі є батареї з алюмінію. Матері в селі встановив “ION” на 2 кіловати . мати не може натішитися . не треба купувати дрова , пиляти .  

Re: Re: “ION”.

Николай (с.Выгода Одесской обл.) Почитал в интернете чушь которую писаки про “ION” пишут, не выдержал, решил написать свое мнение. У меня установка работает четыре года и все мои родычи купили . У нас в селе нет газа и электрокотел спасение если не хотите углем топить. По опыту могу сказать – котлом доволен и с ним никаких проблем. У моего соседа ТЭНОВЫЙ “КОСПЕЛ”, жрет электрики в половину больше моего , в самые морозы зимой сгорели тэны так ему насчитали за эти тэны столько , сколько я за свой котел заплатил.

Re: Re: “ION”.

Антонина г Харьков. Год потратила на беготню по ЖЕКАМ .Пока денег не дала не хотели отключать центральное отопление. Сначала хотели поставить газовый котел «BERETTA»  не дали разрешения.  Муж установил  “ION”прямо в нашу систему отопления, по деньгам вышло в два раза дешевле  чем с газовым котлом . Не могли долго запустить ( муж упрямый ) хотел все сам сделать . Связались с фирмой  , а проблема была с водой. Пришлось соду добавить в воду и все заработало. Зимой я ненарадуюсь , в квартире тепло-красота. Не экономьте на установке- приглашайте специалистов.

Re: Re: “ION”.

GHOSTE. Имею в Ирпене частный дом , стоит житомирский газовый котел  , греет хорошо , но в сильные морозы давление газа так падает , что конфорки еле горят . Поставил осенью “ION” , как дополнительное отопление , зимой в доме Ташкент  и по деньгам почти не отличается от газа. К стати  сосед рассказывал , что  в газ подмешивают какую-то гадость ,( кто газом отапливает знают после сгорания вонь невыносимая) Короче счетчик мотает на 1000 кубов, а реально там  800 газа и 200 этой дряни , которая не горит и импортные котлы часто ломаются.

Re: Re: “ION”.

Александр Сергеевич. Год назад поставил “ION” в сельский дом матери, все село сбежалось смотреть на это чудо. Соседи покупают машину дров за 800 гривен и  топят без останову. А у матери вышло за сезон  около 1000 гривен вместе  с другими электроприборами. Если  окна поменяю на современные , экономия будет приличная .

Re: Re:”ION”.

Василий.У меня в доме стоит”ION” . Отлично работает, экономия реальная, в связи с подорожанием газа, мне еще радосней!! :))) и платить стало еще меньше. Стоял газовый JUNKER, не выкинул, но и не использую, да и уже врядли буду!

Re: “ION”.

Сергей. Я использую 2-ой сезон. Квартира 52 кв.м (140 куб.м). Котел “ION”. -3. Жрет при 0 градусах на улице 1,25 кв.час, при -20 – 2 кв.час. Температура в квартире + 20 С.

Re: “ION”.

Анатолий Иванович.в интернете за этими котлами наблюдал 5 лет. Так как газ себе не мог поставить (дом не оборудован) поставил котёл .  6квт квартира 65 кв.м ,1 этаж, панельный дом, хододный(на следующий год буду утеплять) тянет холод с подвала. в месяц от 700-1500 квт в зависимости от температуры на улице. заправил дистилированой водой никаких проблем. важно что бы работы выполнял грамотный и опытный специалист, а не разговорчивы продавец и убедительно говорящая девочка в сервисном центр, чаще всего эти девочки незнают существенных ньюансов( да и откуда им знать, не в обиду им было сказано)из-за которых потом вытекают проблемы о которых здесь так говорят . Я лично Доволен  Потому как у соседей стоят на 50кв.м конвектора получаеться 1600квтза этот-же месяц у другого соседа котёл “ION”.  5квт” на 67 кв.м- 1300 кВт квартиры по утеплению похожи. а вот ещё одни данные бабушка пенсионерка тоже 67 кв.м, квартира аналогична моей панельный дом 9 этаж, 6квТ котёл, в месяц от 700-1200квт, 20-21градус тепла, на улице падала температура от 0 до -15градусов

Re: “ION”

Иван Грозный. минусы ковекторов: сушить на ни ничего нельзя , а если это жилое помещение то это имеет важность. те соседи кто поставил конвектора бояться их оставлять когда никого в квартире нет.Скажу чесно минусы котла: если ставить будете по паспорту то там не всё описано или если ставит вам такой же мастер , который только паспорт в руках держал то будут проблемы. если нужен совет то дам. Совет бесплатный. И ещё если будете покупать котёл не покупайте его по квадратуре которая указана в паспорте. Учитывайте и батареи и обьём воды, а если вы вэтом непонимаете то берите котёл по больше мощностью, если прогадаете с мощностью то переплатите в месяц за лишние кВт

Re: (ЭОУ).

Ответ Ивану Грозному. Представитель производителя “ION”.

1. Если все условия по монтажу выполнены в соответствии с ТУ  и правильно рассчитаны все показатели , кубатура, высота потолков  и т,д. –  установка будет работать в соответствии с заявленными показателями.

2. Если теплоизоляция вашего помещения неудовлетворительная , то никакое отопление не даст заявленных показателей. 

Foundry Select Galan Frame журнальный столик и обзоры

Этот журнальный столик с изысканной обработкой дерева и металла с естественной отделкой в ​​деревенском стиле будет выглядеть уютно и надежно в любом доме. Этот журнальный столик, незаменимый в любом благоустроенном доме, отличается очаровательным индустриальным характером и функциональной прочностью. Его чистый силуэт отражает исключительный вкус хозяина, а его нейтральные свойства могут сливаться с широким спектром внутреннего оформления., Промышленный стиль этого стола сочетает в себе деревянную столешницу с отделкой из состаренного дуба и прочную стальную раму с порошковым покрытием, что создает поистине деревенскую атмосферу. 4 самоклеящихся прямоугольных мебельных подкладки для стальных ножек, напоминающих салазки, гарантируют, что журнальный столик не поцарапает пол.

Характеристики

• МИНИМАЛИСТИЧЕСКИЙ ДИЗАЙН: убрав все ненужные элементы и сосредоточив внимание на том, что должно быть, минималистичный журнальный столик можно резюмировать: он прост, со вкусом и создает чистое и свободное от помех пространство. идеально подходит для отдыха
• ПРОМЫШЛЕННЫЙ СТИЛЬ РУСТИКА: Чистый дизайн сочетается с деревенским промышленным стилем в этом харизматичном журнальном столике.Этот журнальный столик, со вкусом оформленный в обновленной эстетике, изготовлен из МДФ с текстурой дерева, в то время как стальная рама с чистой подкладкой и матово-черной отделкой с порошковым напылением создает изысканный контраст.
• СУПЕР ПРОСТОТА СБОРКИ: Этот журнальный столик спроектирован таким образом, чтобы каждый мог легко его собрать. Следуя нашей четкой инструкции по сборке, собрать этот простой журнальный столик можно всего за 5 минут. Предоставляется все оборудование и инструкция по сборке.
• ПРОЧНОСТЬ и ДОЛГОВЕЧНОСТЬ: столешница толщиной 2 дюйма и толстая металлическая трубка делают этот деревенский коктейльный стол очень прочным, а грузоподъемность этого журнального столика составляет более 300 фунтов
• БЕСПЛАТНАЯ ГАРАНТИЯ: Мы обещаем 30 дней возврата денег Гарантия, 12-месячная гарантия качества без беспокойства и дружелюбное обслуживание клиентов

Подробная информация о продукте

• Верхний материал: искусственная древесина
• Базовый материал: обработанная древесина
• Уровень сборки: требуется полная сборка
• Количество включенных таблиц: 1

Сравнительное транскриптомное исследование Escherichia coli O157: H7 в ответ на омический нагрев и традиционный нагрев

Основные моменты

•

Ответ транскриптома E.coli к LVOH и WB был сильнее, чем HVOH.

•

Было больше генов, активируемых после HVOH, LVOH и WB.

•

Электрический эффект на транскриптом E. coli не был очевиден для HVOH и LVOH.

Реферат

В этом исследовании высокопроизводительный метод секвенирования мРНК Illumina HiSeq 2000 был использован для изучения транскриптомного ответа Escherichia coli O157: H7, подвергнутого омическому нагреву (OH) и нагреву на водяной бане (WB). .По сравнению с необработанными образцами в общей сложности 293, 516 и 498 генов показали дифференциальную экспрессию после HVOH (кратковременное омическое нагревание под высоким напряжением), LVOH (длительное омическое нагревание под низким напряжением) и WB, соответственно. Следовательно, LVOH потенциально может оказывать сравнимые эффекты на транскриптом E. coli O157: H7 по сравнению с WB, но не HVOH. Эти результаты показали, что дополнительные нетепловые эффекты не отражались на транскриптоме E. coli O157: H7 с использованием как HVOH, так и LVOH, в частности HVOH.Большинство дифференциально экспрессируемых генов, участвующих в хранении и обработке информации, а также клеточных процессах и передаче сигналов, показали повышенную регуляцию, тогда как большинство генов, связанных с метаболизмом, подавлялись после HVOH, LVOH и WB. Кроме того, необходимо уделять больше внимания усилению регуляции большого количества генов вирулентности, что может повысить способность выживших E. coli O157: H7 инфицировать клетки-хозяева после HVOH, LVOH и WB. Это транскриптомное исследование ответа E.coli O157: H7 в OH дает представление о механизме инактивации OH на молекулярном уровне и открывает двери для будущих исследований OH.

Ключевые слова

Омический нагрев

Водяная баня

E. coli O157: H7

Транскриптомный анализ

Экспрессия гена

Рекомендуемые статьи Цитирующие статьи (0)

© 2020 Elsevier Ltd. Все права зарезервированный.

Рекомендуемые статьи

Цитирующие статьи

Идеальный дом для отдыха с бассейном в деревне Пиренеи ОБНОВЛЕНО 2021 – Tripadvisor

Риск теплового стресса в молочном животноводстве Европы при различных сценариях изменения климата – неопределенности и потенциальные воздействия

Acatincăi, S., Gavojdian, D., Stanciu, G., Cziszter, L.T., Tripon, I., и Баул, С.: Исследование поведения руминации у крупного рогатого скота – принятая позиция коровами во время процесса жевания, научными работами по зоотехнике и Биотехнологии, 43, 199–202, 2010. a

Аллен, Дж., Андерсон, С., Кольер, Р., Смит, Дж.: Управление тепловым стрессом и его влияние на поведение коров, в: 28th Annual Southwest Nutrition and Конференция по менеджменту, 6–8 марта 2013 г., Рино, Невада, США, 2013 г.а

Аллен, Дж., Холл, Л., Кольер, Р., Смит, Дж .: Влияние основного тела температуры, времени суток и климатических условий на поведенческие модели лактирующие молочные коровы, испытывающие тепловой стресс от легкой до умеренной, J. Молочные науки, 98, 118–127, 2015. а, б

Амон, Б., Криворучко, В., Фрёлих, М., Амон, Т., Пёллингер, А., Мезенбахер И. и Хауслейтнер А .: Аммиак и парниковый газ. выбросы из системы подачи соломы при откорме свиней: содержание и навоз хранение, Livest. Sci., 112, 199–207, 2007. a

Андерсон, С., Брэдфорд, Б., Харнер, Дж., Такер, К., Чой, К., Аллен, Дж., Холл, Л., Рунгруанг, С., Кольер, Р., Смит, Дж .: Эффекты регулируемого и стационарные вентиляторы с господами по температуре тела и лживому поведению лактирующие молочные коровы в полузасушливом климате, J. Dairy Sci., 96, 4738–4750, 2013. a, b

Angrecka, S. и Herbut, P .: Условия развития холодового стресса в молочный скот, содержащийся в стойле в условиях сильных морозов, чех J.Anim. Sci., 60, 81–87, https://doi.org/10.17221/7978-CJAS, 2015. a

Бейли К., Джонс К. и Хайнрихс А .: Экономическая отдача от Гольштейна и Джерси стада по многокомпонентным ценам, J. Dairy Sci., 88, 2269–2280, 2005. a

Берман, А .: Оценка потребностей в снятии теплового стресса для молочных коров голштинской породы 1, J. Anim. Наук, 83, 1377–1384, 2005. а

Берман, А., Фольман, Ю., Каим, М., Мамен, М., Герц, З., Вулфенсон, Д., Ариэли, А., и Грабер, Ю.: Верхние критические температуры и принудительная вентиляция. эффекты для высокопродуктивных молочных коров в субтропическом климате, Дж.Молочные науки, 68, 1488–1495, 1985. a

Бернабуччи, У., Биффани, С., Бугджотти, Л., Витали, А., Ласетера, Н., и Нардоне, А .: Последствия теплового стресса у итальянского голштинского молочного скота. J. Dairy Sci., 97, 471–486, 2014. a, b

Бьянка, В .: Относительное значение температуры сухого и влажного термометров в возникновении тепловой стресс у крупного рогатого скота, Природа, 195, 251–252, 1962. a

Бохманова, Дж., Мишталь, И., Коул, Дж .: Индексы температуры-влажности как показатели потерь надоев молока из-за теплового стресса, J.Молочные науки, 90, 1947–1956, 2007. а, б, в, г

Бурауи, Р., Лахмар, М., Майдуб, А., Джемали, М., и Бельеа, Р.: взаимосвязь температурно-влажностного индекса с молочной продуктивностью дойных коров в средиземноморском климате Anim. Res., 51, 479–491, 2002. a, b

Broucek, J .: Производство выбросов метана от животноводства: обзор, J. Environ. Prot., 5, 1482–1493, https://doi.org/10.4236/jep.2014.515141, 2014. a

Броучек Ю., Летковичова М. и Ковальчуй К.: Оценка влияния холодового стресса на дойных коров, Междунар. Дж. Biometeorol., 35, 29–32, 1991. a

Broucek, J., Ryba, S., Mihina, S., Uhrincat, M., and Kisac, P .: Impact of температурно-влажностный показатель по удоям молока в условиях различных молочных менеджмент, J. Anim. Feed Sci., 16, 329–344, https://doi.org/10.22358/jafs/66755/2007, 2007. a, b

Браун-Брандл, Т., Эйгенберг, Р., Ниенабер, Дж., И Хан, Г.Л .: Динамический показатели реакции на тепловой стресс у затененного и незатененного откормочного скота, Часть 1: Анализ индикаторов, Биосист.Eng., 90, 451–462, 2005. a

Брюгеманн К., Гернанд Э., Кениг фон Борстель У. и Кениг С .: Определение и оценка пороговых значений теплового стресса у различных молочных коров производственные системы, Arch. Anim. Breed., 55, 13–24, 2012. a

Cannon, A.J .: Коррекция смещения многомерного квантильного отображения: N-мерное преобразование функции плотности вероятности для моделирования климата несколько переменных, Клим. Динамика, 50, 31–49, https://doi.org/10.1007/s00382-017-3580-6, 2018. a

Карабано, М.-Дж., Логар, Б., Борман, Дж., Минет, Дж., Ванробайс, М.-Л., Диаз, К., Тихон, Б., Генглер, Н., Хаммами, Х .: Моделирование теплового стресса в условиях различные условия окружающей среды, J. Dairy Sci., 99, 3798–3814, 2016. а, б, в

Кристенсен, Дж., Хьюитсон, Б., Бусуйок, А., Чен, А., Гао, X., Хельд, И., Джонс, Р., Колли, Р., Квон, В.-Т., Лаприс, Р., Магана Руэда, В., Мирнс, Л., Менендес, К., Райсанен, Дж., Ринке, А., Сарр, А., и Веттон, П .: Региональные климатические прогнозы, в: IPCC Climate Change 2007: The Physical Основы науки, под редакцией: Соломон, С., Цинь, Д., Мэннинг, М., Хен, З., Маркиз, М., Аверит, К., Тиньор, М., Миллер, Х., Cambridge University Press, Кембридж, Великобритания и Нью-Йорк, Нью-Йорк, США, 2007 г. a

Кольер, Р. Дж., Холл, Л. В., Рунгруанг, С., Цимблман, Р. Б.: Количественная оценка тепловой стресс и его влияние на обмен веществ и работоспособность, Тр. Симптоматология питания жвачных животных Флориды, Департамент Науки о животных, Университет Аризоны, Гейнсвилл, США, стр. 68, 2012. а, б, в

Кук, Н., Ментинк, Р., Беннет, Т., и Берги, К.: Эффект теплового стресса. и хромота в срок у лактирующих молочных коров, J. Dairy Наук, 90, 1674–1682, 2007. а, б

Кертис, А., Шарф, Б., Эйхен, П., и Спайерс, Д.: Отношения между условия окружающей среды, температурный режим и потребление корма КРС летом тепловой стресс с доступом к тени, J. Therm. Биол., 63, 104–111, 2017. а

да Коста, А. Н. Л., Фейтоса, Дж. В., Монтесума, П. А., де Соуза, П. Т., и де Араужо, А. А .: Ректальная температура, частота дыхания, продукция и воспроизводственные показатели помесных коров Джироландо в условиях теплового стресса в северо-восточная Бразилия, Int.J. Biometeorol., 59, 1647–1653, 2015. а, б

Да Силва, Р.Г., Майя, А.С.С., и де Маседо Коста, Л.Л .: Индекс термического стресс для коров (ITSC) при высокой солнечной радиации в тропических условиях, Int. J. Biometeorol., 59, 551–559, 2015. a

Дэвисон, Т., Йонссон, Н., Майер, Д., Гоган, Дж., Эрлих, В., и Макгоуэн, М .: Сравнение влияния шести стратегий управления тепловой нагрузкой на тепловую нагрузку. ответные меры и молочная продуктивность молочных коров на пастбищах и пастбищах в субтропическая среда, Int.J. Biometeorol., 60, 1961–1968, 2016. a

Дель Прадо А., Сколфилд Д., Чедвик Д., Мисселбрук Т., Хейгарт П., Хопкинс А., Дьюхерст Р., Джонс Р., Мурби Дж., Дэвисон П., Лорд Э., Тернер М., Айкман П., и Шредер Дж .: А рамки моделирования для определения новых интегрированных систем молочного производства в: 21-е Общее собрание Европейской федерации пастбищ (EGF), 3–6 апреля 2006 г., Бадахос, Испания, 766–768, 2006 г. a

Де Ренсис, Ф. и Скарамуцци, Р. Дж .: Тепловой стресс и сезонные воздействия на воспроизводство молочной коровы – обзор, Theriogenology, 60, 1139–1151, 2003 г.а

Де Ренсис, Ф., Гарсиа-Испьерто, И. и Лопес-Гатиус, Ф .: Сезонная жара. стресс: клинические последствия и гормональное лечение для фертильности молочные коровы, Териогенология, 84, 659–666, 2015. a

Дипен, К. В., Вольф, Дж., Кеулен, Х. В., и Раппольд, К.: WOFOST: моделирование модель растениеводства, Управление землепользования., 5, 16–24, 1989. a

Дикмен, С. и Хансен, П .: Индекс температуры-влажности – лучший индикатор? теплового стресса у лактирующих молочных коров в субтропической среде ?, J.Молочные науки, 92, 109–116, 2009. а, б

Дирксен, Г., Грюндер, Х., Грюнерт, Э., Краузе, Д., и Стёбер, М .: Клиническое обследование крупного рогатого скота, 3-е изд., Verlag Paul Parey, Берлин, Германия, 1990. a

Досио, А .: Прогнозы климатических изменений, индексов температуры и осадки из ансамбля скорректированных смещением высокого разрешения EURO-CORDEX региональные климатические модели, J. Geophys. Рес.-Атмос., 121, 5488–5511, 2016. a

Эфрон, Б.: Методы начальной загрузки: новый взгляд на складной нож, Энн.Stat., 7, 1–26, https://doi.org/10.1214/aos/1176344552, 1979. a

Эфрон, Б. и Тибширани, Р.: Методы начальной загрузки для стандартных ошибок, уверенность Интервалы и другие меры статистической точности, Stat. Наук, 1, 54–75, https://doi.org/10.1214/ss/1177013815, 1986. a

Европейская комиссия – ЕС FADN: Отчет о молочных фермах ЕС на основе данных FADN за 2016 г., доступен по адресу: https: // ec. europa.eu/agriculture/fadn_en (последний доступ: 11 апреля 2019 г.), 2018. a

Фидлер, А., Фишер, Дж., Хемпель, С., Саха, К., Лебсин, К., Берг, В., Амон, Б., Брунш, Р., Амон, Т.: Поля потока внутри молочного коровника – Измерения, физическое моделирование и численное моделирование // Труды Международная конференция агроинженерии AgEng, 6–10 июля 2014 г., Цюрих, Швейцария, 1–5, 2014. a, b

Продовольственная и сельскохозяйственная организация Объединенных Наций (ФАО): Влияние бедствий на сельское хозяйство – Оценка информационного пробела, доступно по адресу: http://www.fao.org/3/a-i7279e.pdf (последний доступ: 10 сентября 2018 г.), 2017. a

Форд, Б.: Обзор горячих процедур, в: Неполные данные в выборке Surveys: Theory and Bibliographies, под редакцией: Madow, W., Olkin, I., and Рубин Д., Academic Press, Нью-Йорк, США, 1983. a

Fournel, S., Ouellet, V., and Charbonneau, É .: Практики облегчения тепловой стресс молочных коров во влажном континентальном климате: обзор литературы, Животные, 7, 37, https://doi.org/10.3390/ani7050037, 2017. a

Galán, E., Ллонч, П., Виллагра, А., Левит, Х., Пинто, С., и дель Прадо, А .: Систематический обзор животноводческой продукции, не связанной с производительностью труда. показатели устойчивости молочного скота к тепловому стрессу, PloS one, 13, e0206520, https://doi.org/10.1371/journal.pone.0206520, 2018. a, b, c, d

Гоган, Дж., Мадер, Т. Л., Холт, С., и Лайл, А.: Новый индекс тепловой нагрузки для откормочная площадка крупного рогатого скота, J. ​​Anim. Sci., 86, 226–234, 2008. а

Гебремедин, К. и Ву, Б .: Моделирование поля потока вентилируемого и занимаемое животным пространство с различными условиями входа и выхода, J.Therm. Биол., 30, 343–353, 2005. a

Георгий, Ф. и Гутовски-младший, У. Дж .: Динамическое масштабирование регионов и Инициатива CORDEX, Annu. Rev. Env. Ресурс., 40, 467–490, г. 2015. а

Гренестейн, К., Хатчингс, Н., Хенель, Х., Амон, Б., Мензи, Х., Миккельсен, М., Миссельбрук, Т., ван Брюгген, К., Куппер, Т., и Уэбб, Дж .: Сравнение выбросы аммиака, связанные с эффективностью использования азота в животноводстве в Европе J. Clean. Prod., 211, 1162–1170, 2019. a

Герни, К.: Введение в нейронные сети, UCL Press Limited, отпечаток группы Taylor & Francis, Лондон, Великобритания, 1997. a

Хан, Г .: Динамические реакции крупного рогатого скота на тепловые тепловые нагрузки, J. Anim. Sci., 77, 10–20, 1999. а

Хаммами, Х., Карабаньо, М.-Дж., Логар, Б., Ванробайс, М.-Л., и Генглер, Н .: Генотип x Климатические взаимодействия для выхода белка с использованием четырех европейских Популяции голштинской породы, в: Материалы 10-го Всемирного конгресса генетиков. Применительно к животноводству, 17–22 августа 2014 г., Ванкувер, Канада, 2014 год.а

Хитон, Дж .: Искусственный интеллект для людей, Том 3: Глубокое обучение и Нейронные сети, Серия «Искусственный интеллект для людей», CreateSpace Платформа независимых публикаций, Heaton Research, Inc., Честерфилд, США, 2015. a

Хайнике, Дж., Хоффманн, Г., Аммон, К., Амон, Б., и Амон, Т.: Эффекты суточная продолжительность тепловой нагрузки, превышающая установленные пороги тепловой нагрузки на особенности активности лактирующих молочных коров, J. Therm. Биол., 77, 67–74, 2018. a, b, c, d

Heinicke, J., Ибшер, С., Белик, В., Амон, Т .: Индивидуальная активность коров реакция на накопление продолжительности тепловой нагрузки, J. Therm. Biol., 82, 23–32, https://doi.org/10.1016/j.jtherbio.2019.03.011, 2019. a

Хемпель, С. и Менц, Ч .: Прогнозы климата в помещении для европейских животноводческих помещений. Mendeley Data, v1, https://doi.org/10.17632/tjp8h523p7.1, 2019. a

Hempel, S., Frieler, K., Warszawski, L., Schewe, J., and Piontek, F .: Коррекция смещения, сохраняющая тенденцию – подход ISI-MIP, Earth Syst.Dynam., 4, 219–236, https://doi.org/10.5194/esd-4-219-2013, 2013. a

Hempel, S., Wiedemann, L amd Ammon, C., Fiedler, A., Saha, C. и Janke, D. Л. К., Фишер, Дж., Амон, Б., Хоффманн, Г., Менц, К., Чжан, Г., Халахми, И., Дель Прадо, А., Эстеллес, Ф., Берг, В., Брунш, Р., Амон, Т.: Определите характеристики потока молочных коровников с естественной вентиляцией до оптимизировать климат в коровнике, в: 12. Tagung: Bau, Technik und Umwelt 2015 in der landwirtschaftlichen Nutztierhaltung, 8–10 сентября 2015 г., KTBL, Дармштадт, Германия, 346–351, 2015a.а

Хемпель, С., Видеманн, Л., Аммон, К., Фидлер, М., Саха, К., Лебсин, К., Фишер, Дж., Берг, В., Брунш, Р., Амон, Т .: Оценка схемы протока в молочных коровниках с естественной вентиляцией – три метода, один комплексный подход, в: РАМИРАН 2015 – Городской и сельский симбиоз, под редакцией: Кёрнер, И., TC-O_16, TUTech Verlag, Гамбург, Германия, Гамбургский технологический университет, Германия, 356–359, электронная книга, 2015b. a

Hempel, S., Janke, D., König, M., Menz, C., Englisch, A., Пинто, С., Сибони, В., Халачми, И., Ронг, Л., Зонг, К., Чжан, Г., Санчис, Э., Эстель, Ф., Кальвет, С., Галан, Э., дель Прадо, А. , Аммон, К., Амон, Б., и Амон, Т .: Комплексное моделирование для оценить возможности оптимизации климата в помещениях для крупного рогатого скота, Advances in Animal Биологические науки, 7, 261–262, https://doi.org/10.1017/S2040470016000352, 2016a. а, б

Хемпель, С., Саха, К. К., Фидлер, М., Берг, В., Хансен, К., Амон, Б., и Амон, Т .: Нелинейная зависимость выбросов аммиака и метана от температуры молочный коровник с естественной вентиляцией, Биосист.Eng., 145, 10–21, 2016b. a, b, c, d

Hempel, S., Menz, C., Halachmi, I., Zhang, G., del Prado, A., Estelles, F., Amon, B., and Amon, T. : Отчет о совещании по оценке ценности FACCE-JPI, доступен по адресу: https://www.faccejpi.com/content/download/5161/48933/version/1/file/FACCE-JPI_Synthesis-valorisation-survey-results-FINAL.pdf ( последний доступ: 11 апреля 2019 г.), 2017a. a

Hempel, S., Menz, C., Halachmi, I., Zhang, G., del Prado, A., Estelles, F., Amon, B., и Amon, T .: Отчет по ERANET + mid- срочная встреча, доступная по адресу: https: // www.faccejpi.com/content/download/5163/48955/version/2/file/Projects+booklet_updated+08+May+2017.pdf (последний доступ: 11 апреля 2019 г.), 2017b. a

Hempel, S., Menz, C., Halachmi, I., Zhang, G., del Prado, A., Estelles, F., Amon, B., и Amon, T .: Отчет по ERANET + mid- срочная встреча, доступно по адресу: https://www.faccejpi.com/content/download/5295/50720/version/1/file/OptiBarn_presentation_ERA_NET+final+meeting+March28[1pting.pdf (последний доступ: 11 апреля 2019 г.) , 2017c. а

Хемпель, С., Кениг, М., Менц, К., Янке, Д., Амон, Б., Банхази, Т. М., Эстеллес, Ф., и Амон, Т .: Неопределенность в измерении внутренней температура и влажность в молочных помещениях с естественной вентиляцией, как под влиянием методики измерения и изменчивости данных, Biosyst. Eng., 166, 58–75, 2018. а, б, в, д

Гербут П. и Ангрецка С .: Взаимосвязь между уровнем THI и молочными коровами. поведение в летний период, Итал. J. Anim. Наук, 17, г. 226–233, 2018. a

Гербут П., Ангрецка С., Навалани Г. и Адамчик К.: Пространственное и временное параллельное распределение температуры, относительной влажности и скорости воздуха доильный зал в летний период, Ann. Anim. Наук, 15, 517–526, 2015. а

Хоффманн, И.: Изменение климата и характеристика, разведение и сохранение генетических ресурсов животных, Anim. Genet., 41, 32–46, 2010. a

Хониг, Х., Мирон, Дж., Лерер, Х., Джекоби, С., Захут, М., Зиноу, А., Портник, Ю., Моаллем У.: Продуктивность и благополучие высокопродуктивных молочных коров. подвергаться 5 или 8 сеансам охлаждения ежедневно в жарком и влажном климате, Дж.Dairy Sci., 95, 3736–3742, 2012. a, b, c, d

Hübener, H., Bülow, K., Fooken, C., Früh, B., Hoffmann, P., Хепп, С., Койлер, К., Менц, К., Мор, В., Радтке, К., Рамтун, Х., Спекат, А., Стегер, К., Туссен, Ф., Варрах-Саги, К., и Вольдт, М.: ReKliEs-De Ergebnisbericht, Tech. представитель, Мировой центр данных по климату (WDCC) в DKRZ, Гамбург, Германия, https://doi.org/10.2312/WDCC/ReKliEsDe_Ergebnisbericht, 2017. a

Хатчингс Н., Соммер С. Г. и Джарвис С. Модель испарения аммиака. с пастбищной животноводческой фермы Атмос.Environ., 30, 589–599, 1996. a

Джексон П. и Кокрофт П.: Клиническое обследование сельскохозяйственных животных, Вили-Бэквелл, Хобокен, США, 2008. a

Кадзере, К., Мерфи, М., Силаников, Н., Мальц, Э .: Тепловой стресс в лактирующие молочные коровы: обзор, Livest. Sci., 77, 59–91, 2002. a, b, c, d, e

Kafle, G.K., Joo, H., and Ndegwa, P.M .: Длительность и частота выборки для Определение уровней выбросов из естественно вентилируемых молочных коровников, T. ASABE, 61, 681–691, https: // doi.org / 10.13031 / trans.12543, 2018. a

Кендалл П., Нильсен П., Вебстер Дж., Веркерк Г., Литтлджон Р. и Мэтьюз, Л .: Эффект обеспечения тени лактирующим дойным коровам в умеренный климат, Livest. Sci., 103, 148–157, 2006. a

Kjellström, E., Nikulin, G., Strandberg, G., Christensen, OB, Jacob, D., Keuler, K., Lenderink, G., van Meijgaard , E., Schär, C., Somot, S., Sørland, SL, Teichmann, C., and Vautard, R .: Изменение климата в Европе при повышении средней глобальной температуры на 1.На 5 и 2 ° C выше доиндустриальных условий, смоделированных региональными климатическими моделями EURO-CORDEX, Earth Syst. Dynam., 9, 459–478, https://doi.org/10.5194/esd-9-459-2018, 2018. а, б

Курукуласурия, П. и Розенталь, С .: Изменение климата и сельское хозяйство: обзор воздействий и адаптации, Документы Департамента окружающей среды, №2. 91, Серия «Изменение климата», Всемирный банк, Вашингтон, округ Колумбия, США, 2013. a

Лис, Дж., Лис, А. и Гоган, Дж .: Разработка индекса тепловой нагрузки для лактирующих молочных коров, Anim.Prod. Sci., 58, 1387–1391, https://doi.org/10.1071/AN17776, 2018. а, б

Лелиевельд, Дж., Эванс, Дж. С., Фнаис, М., Джаннадаки, Д., и Поззер, А. вклад источников загрязнения атмосферного воздуха в преждевременную смертность глобальный масштаб, Nature, 525, 367–371, 2015. a

Мадер Т. Л., Дэвис М. и Браун-Брандл Т. Факторы окружающей среды. влияние теплового стресса у откорма крупного рогатого скота, J. ​​Anim. Наук, 84, 712–719, 2006. а, б, в

Мэдер Т. Л., Джонсон Л. и Гоган Дж.: Исчерпывающий индекс для оценки экологический стресс у животных, J. Anim. Sci., 88, 2153–2165, 2010. а

Мендес, Л. Б., Эдуард, Н., Огинк, Н. В., Ван Дурен, Х. Дж. К., Ильда де Фатима, Ф. Т., и Москера, Дж.: Пространственная изменчивость соотношений смешивания аммиак и индикаторные газы в коровнике для молочных коров с естественной вентиляцией, Biosyst. Eng., 129, 360–369, 2015. a

Монтени, Г., Гренестейн, К., Хильхорст, М .: Взаимодействия и связи. между выбросами метана и закиси азота от животноводства, Nutr.Цикл. Agroecosys., 60, 123–132, 2001. a

Нардоне, А., Рончи, Б., Ласетера, Н., Раньери, М.С., и Бернабуччи, У .: Влияние климатических изменений на животноводство и устойчивость животноводческие системы, Животноводство. Sci., 130, 57–69, 2010. а, б, в

NRC: Руководство по экологическим исследованиям на животных, Национальная академия наук, Вашингтон, округ Колумбия, США, 1971. a

Олесен, Дж. Э. и Бинди, М .: Последствия изменения климата для Европы. продуктивность сельского хозяйства, землепользование и политика, Eur.J. Agron., 16, 239–262, 2002. a

Омински К., Кеннеди А., Виттенберг К. и Ниа С. М .: Физиологические и реакция продуктивности на режим кормления у лактирующих молочных коров, подвергшихся воздействию кратковременный умеренный тепловой стресс, J. Dairy Sci., 85, 730–737, 2002. а

Ортис, X., Смит, Дж., Рохано, Ф., Чой, К., Брюер, Дж., Стил, Т., Шуринг, Н., Аллен, Дж., И Кольер, Р.: Оценка кондуктивного охлаждения кормящих грудью. дойные коровы в контролируемых условиях окружающей среды, J. Dairy Sci., 98, 1759–1771, 2015. а, б, в

Пачаури, Р.К., Аллен, М.Р., Баррос, В.Р., Брум, Дж., Крамер, В., Крайст, Р., Черч, Д.А., Кларк, Л., Дахе, К., Дасгупта, П., Дубаш, Н.К., Эденхофер, О., Эльгизули, И., Филд, CB, Форстер, П., Фридлингштейн, П., Фуглестведт, Дж., Гомес-Эчеверри, Л., Халлегатт, С., Хегерл, Г., Хауден, М. , Цзян, К., Хименес Сиснероз, Б., Катцов, В., Ли, Х., Мах, К.Дж., Мароцке, Дж., Мастрандреа, доктор медицины, Мейер, Л., Минкс, Дж., Мулугетта, Ю., О’Брайен, К., Оппенгеймер, М., Перейра, Дж. Дж., Пичс-Мадруга, Р., Платтнер, Г. К., Пёртнер, Х.О., Пауэр, С.Б., Престон, Б., Равиндранат, Н.Х., Райзингер, А., Риахи, К., Рустикуччи, М., Скоулз, Р., Сейбот, К., Сокона, Ю., Ставинс, Р., Стокер, Т. Ф., Чакерт, П., ван Вуурен, Д., и ван Ипсерле, Дж. П.: Изменение климата, 2014 г .: Сводный отчет. Вклад рабочих групп I, II и III в Пятый доклад об оценке Межправительственной группы экспертов по изменению климата, под редакцией: Пачаури, Р. и Мейер, Л., Женева, Швейцария, МГЭИК, 151 стр., 2014. а, б

Педерсен, С. и Сэлльвик, К .: Климатизация животноводческих помещений. Тепло и производство влаги на уровне животных и птичников, Исследовательский центр Bygholm, Датский институт сельскохозяйственных наук, Хорсенс, Дания, 2002 г. a

Пинто, С., Левит, Х., Мюшнер-Сименс, Т., Хоффманн, Г., Аммон, К., Halachmi, I., Heuwieser, W., and Amon, T.: Влияние испарительного охлаждения. по частоте дыхания лактирующих коров в условиях жаркого климата, в: Нов. Инженерные концепции для полноценного сельского хозяйства.Европейская конференция Сельскохозяйственная инженерия EurAgEng 2018, Вагенинген, Нидерланды, 808–812, 2019a. а, б, в

Пинто, С., Хоффманн, Г., Аммон, К., Амон, Б., Хойвизер, В., Халахми, И., Банхази Т. и Амон Т. Влияние климата в коровнике, положения тела и молока удой по частоте дыхания дойных коров, Ann. Anim. Наук, 19, 469–481, 2019b. a, b

Пинто, С., Хоффманн, Г., Аммон, К., Хойвизер, В., Левит, Х., Халахми, И., и Амон, Т.: Влияние двух частот охлаждения на частоту дыхания в кормящий молочные коровы в условиях жаркого и влажного климата, Ann.Anim. Наук, 19, 821–834, https://doi.org/10.2478/aoas-2019-0026, 2019c. а, б

Польский Л. и фон Кейзерлингк М. А .: Приглашенный обзор: Эффекты теплового стресса. о благополучии молочного скота, J. ​​Dairy Sci., 100, 8645–8657, 2017. a, b, c

Queiroz, M. P. G., Naas, I. d. А., и Сампайо, С. А. d. П .: Оценка теплового комфорт для поросят с учетом концентрации аммиака, Электронный журнал – СИГР, 7, 05 004 / BC 05 005, 1–10, 2005. а

Раваньоло О. и Мишталь И.: Генетический компонент теплового стресса в молочных продуктах. крупный рогатый скот, оценка параметров, J.Молочные науки, 83, 2126–2130, 2000. a

Рушен, Дж., Мунксгаард, Л., Марнет, П., и ДеПассилле, А .: Контакт с людьми и влияние острого стресса на коров во время дойки, Прил. Anim. Behav. Наук, 73, 1–14, 2001. а

Саджив, Э. П. М., Амон, Б., Аммон, К., Цоллич, В., и Винивартер, В.: Оценка потенциала диетических манипуляций с сырым белком в снижении Выбросы аммиака от навоза КРС и свиней: метаанализ, Nutr. Цикл. Agroecosys., 110, 161–175, 2018. а

Самер, М., Фидлер, М., Мюллер, Х.-Дж., Глэзер, М., Аммон, К., Берг, В., Санфтлебен П. и Брунш Р. Зимние измерения скорости воздухообмена. с использованием метода индикаторного газа и количественной оценки газовых выбросов от молочный коровник с естественной вентиляцией, заявл. Англ. С / х, 27, 1015–1025, 2011. a

Санчис, Э., Кальвет, С., дель Прадо, А., Эстеллес, Ф .: Метаанализ. влияния факторов окружающей среды на выбросы аммиака от молочного скота дома, Биосист. Eng., 178, 176–183, 2019. a

Шюллер, Л.-К .: Влияние теплового стресса на репродуктивную функцию. дойных коров в умеренном климате умеренных широт, канд. дипломная работа, Свободный университет Берлина, Берлин, Германия, 2015 г. a

Шютц, К. Э., Кокс, Н. Р. и Мэтьюз, Л. Р.: Насколько важен оттенок для молочный скот? Выбор между оттенком или укладкой на разных уровнях лживая депривация, заявл. Anim. Behav. Sci., 114, 307–318, 2008. а

Сегналини М., Бернабуччи У., Витали А., Нардоне А. и Ласетера Н.: Сценарии индекса температуры и влажности в бассейне Средиземного моря, Int. J. Biometeorol., 57, 451–458, 2013. а, б

Спайерс, Д., Испания, Дж., Сэмпсон, Дж., И Роадс, Р.: Использование физиологических параметры для прогнозирования удоев и потребления кормов у коров, подвергшихся тепловому стрессу, J. Therm. Биол., 29, 759–764, 2004. a

Шривастава Н., Хинтон Г., Крижевский А., Суцкевер И. и Салахутдинов. Р .: Отсев: простой способ предотвратить переоснащение нейронных сетей, J. Mach. Учить. Исследования, 15, 1929–1958, 2014.а

Стейнфельд, Х., Муни, Х.А., Шнайдер, Ф. и Невилл, Л. Э .: Животноводство в меняющемся ландшафте, том 1: движущие силы, последствия и ответные меры, Остров Press, 2013. a

Сен-Пьер Н., Кобанов Б. и Шнитки Г.: Экономические потери от теплового стресса. по животноводству США1, J. Dairy Sci., 86, E52 – E77, 2003. a, b

Струцке, С., Фиске, Д., Хоффманн, Г., Аммон, К., Хойвизер, В., и Амон, Т.: Разработка неинвазивного датчика частоты дыхания крупного рогатого скота, Дж.Dairy Sci., 2018. a

Sutton, M., Bleeker, A., Howard, C., Bekunda, M., Grizzetti, B., de Vries, W., ван Гринсвен, Х., Аброл, Ю., Адхья, Т., Биллен, Г., Дэвидсон, Э., Датта, А., Диас, Р., Эрисман, Дж., Лю, X., Оенема, О., Палм, К., Рагурам, Н., Рейс, С., Шольц, Р., Симс, Т., Вестхук, Х., Чжан, Ф .: Наш питательный мир: задача производить больше продуктов питания и энергии при меньшем загрязнении, НКРЭ / Центр по экологии и гидрологии, Эдинбург, доступно по адресу: http://nora.nerc.ac.uk/id/eprint/500700 (последний доступ: 11 апреля 2019 г.), 2013.a

Тренберт, К. Э. и Смит, Л .: Масса атмосферы: ограничение на Global Analyses, J. Climate, 18, 864–875, https://doi.org/10.1175/JCLI-3299.1, 2005. а

Valtorta, S.E. и Gallardo, M.R .: Испарительное охлаждение для голштинской молочной фермы. коровы в условиях выпаса, Int. J. Biometeorol., 48, 213–217, 2004. a

van Oldenborgh, G., Collins, M., Arblaster, J., Christensen, J.H., Marotzke, Дж., Пауэр, С., Руммукайнен, М., и Чжоу, Т .: Приложение I: Атлас глобального и Региональные климатические прогнозы, в: Изменение климата 2013: Физика. Базис, под редакцией: Stocker, T., Цинь, Д., Платтнер, Г.-К., Тиньор, М., Аллен, С., Бошунг, Дж., Науэльс, А., Ся, Ю., Бекс, В., и Мидгли, П., Кембридж University Press, Кембридж, Великобритания и Нью-Йорк, штат Нью-Йорк, США, 2013 г. а

Витт, Р., Вебер, Л., Цоллич, В., Хёртенхубер, С. Дж., Баумгартнер, Дж., Нибур, К., Пирингер, М., Андерс, И., Андре, К., Хенниг-Паука, И., Шенхарт, М., и Шаубергер, Г.: Смоделированные характеристики энергосберегающих устройств обработки воздуха для уменьшения тепловыделения. стресс для закрытых животноводческих помещений в Центральной Европе, Biosyst.Eng., 164, 85–97, 2017. а

Ван, X., Ндегва, П. М., Джу, Х., Ниракал, Г. М., Штёкле, К. О., Лю, Х., Харрисон, Дж. Х .: Непрямый метод по сравнению с прямым методом измерения. интенсивность вентиляции в молочных цехах с естественной вентиляцией, Биосист. Eng., 144, 13–25, 2016. а

Ван, X., Гао, Х., Гебремедин, К. Г., Бьерг, Б. С., Ван Ос, Дж., Такер, К. Б., и Чжан, Г.: Исправление к «Прогностической модели эквивалентной температуры. индекс молочного скота (ETIC) », J. Therm. Биол., 76, 165–170, 2018а.a

Ван, X., Гао, Х., Гебремедин, К. Г., Бьерг, Б. С., Ван Ос, Дж., Такер, К. Б., и Чжан, Г.: Прогнозирующая модель эквивалентного температурного индекса для молочных продуктов. крупный рогатый скот (ETIC), J. Therm. Биол., 76, 165–170, https://doi.org/10.1016/j.jtherbio.2018.07.013, 2018b. а, б, в, г

Ван, X., Чжан, G., и Чой, C. Y .: Оценка прецизионной подачи воздуха система в естественно вентилируемых отдельно стоящих молочных коровниках, Biosyst. Англ., 175, 1–15, 2018c. а

Варшавский, Л., Фрилер, К., Хубер, В., Пионтек, Ф., Сердечны, О., и Шеве, J .: Проект взаимного сравнения моделей межсекторального воздействия (ISI – MIP): рамки проекта, P. Natl. Акад. Sci. США, 111, 3228–3232, 2014. a

Вербос, П. Дж .: За пределами регрессии: новые инструменты для прогнозирования и анализа в Науки о поведении, докторская диссертация, Гарвардский университет, Кембридж, США, 1974. a

Вест, Дж .: Влияние теплового стресса на продуктивность молочного скота, Дж. Молочные науки, 86, 2131–2144, 2003. a, b, c, d, e, f

Уильямс, Дж., Джонс, К., Кинири, Дж., И Спанел, Д. А .: ЭПИЧНЫЙ рост урожая. модель, T. ASAE, 32, 497–0511, 1989. a

ВМО: Заявление ВМО о состоянии глобального климата в 2017 г., в: ВМО-№ 1212, Публикационный совет Всемирной метеорологической организации (ВМО), Всемирная метеорологическая организация, Женева, Швейцария, 2018 г. a

Wu, W., Zhai, J., Zhang, G., and Nielsen, P.V .: Оценка методов для определение скорости воздухообмена в помещении для молочного скота с естественной вентиляцией с большими отверстиями с использованием вычислительной гидродинамики (CFD), Atmos.Environ., 63, 179–188, 2012. a

Йи, К., Кениг, М., Янке, Д., Хемпель, С., Чжан, Г., Амон, Б., и Амон, Т .: Исследования в аэродинамической трубе влияния проема боковой стенки на воздушный поток в помещении молочного корпуса с перекрестной вентиляцией, Энерг. Корпуса, 175, 163–172, г. 2018. a, b, c, d

Игнасио Галан, генеральный директор ветроэнергетической компании Iberdrola, занимающей первое место в мире, об электрификации экономики; Приветствие соревнования с игроками нефтегазовой отрасли; Разнообразные применения зеленого водорода и США, являющаяся «основной страной» компании

Галан беседует с вице-председателем IHS Markit Даниэлем Ергином о последних CERAWeek Conversations , доступных на сайте www.ceraweek.com/conversations

В последнем выпуске CERAWeek Conversations Игнасио С. Галан, председатель и главный исполнительный директор Iberdrola, мирового производителя ветроэнергетики, говорит, что он «более чем доволен» растущей конкуренцией. в области возобновляемых источников энергии от традиционных нефтегазовых игроков и что возможности электрификации экономики означают, что «есть место для всех».

В беседе с Даниэлем Ергином, вице-председателем IHS Markit (NYSE: INFO), Галан обсуждает новаторскую роль Iberdrola в ветроэнергетике, несмотря на скептицизм со стороны регулирующих органов, инвесторов и конкурентов; инновационные подходы к энергетическому переходу; многофункциональные применения зеленого водорода в различных отраслях промышленности; и инвестиционные планы Iberdrola на 30 миллиардов долларов в Соединенных Штатах, которые он называет “основной страной” компании.’

Полное видео доступно по адресу: www.ceraweek.com/conversations

Избранные отрывки:
Интервью записано в среду, 18 ноября 2020 г.

(Немного отредактировано для краткости)

• Вкл. традиционные нефтегазовые компании переходят в область возобновляемых источников энергии:

  «Я более чем рад. Теперь они становятся моими конкурентами, а в некоторых случаях они уже являются нашими союзниками, потому что мы ведем переговоры с некоторыми из них о совместных предприятиях.Здесь найдется место для всех. Нам нужно электрифицировать экономику. Инвестиции [для электрификации] требуют утроить инвестиции, которые мы сделали до сих пор. В ближайшие 10 лет нам, вероятно, придется построить около 4000 новых гигаватт электроэнергии. [Там] есть место для всех. Те, кто отрицал и рос против электрификации, [теперь] приветствуются. Приходите на борт ».

• О его видении водородной энергетики:

  « [Мы хотели бы] преобразовать существующие способы использования водорода, которые [производятся] из природного газа, в зеленый водород с помощью электролизеров.Удобрения, мы там. Переработка, мы хотели бы быть там. [И мы] уже работаем над производством стали, чтобы использовать водород вместо угля … В настоящее время мы строим самый большой электролизер в Европе в центре Испании.

  «Мы видим, что во многих промышленных процессах уже используется водород – водород, уже произведенный с использованием природного газа в качестве сырья с использованием процесса парового риформинга метана. Мы видели, что его можно легко преобразовать с помощью электролизеров.Мы достигли соглашения – мы являемся крупнейшим производителем аммиака на юге Европы – о преобразовании всего аммиака, в котором используется водород, в зеленый водород. Видение и цель – полностью исключить выбросы аммиака.

  «Мы наблюдаем то же самое с другими процессами, такими как производство стали или цемента и, в конечном итоге, переработка бензина. Мы будем открыты для их поставок, используя – в случае южной Испании – высокие темпы [солнечной энергии]. Мы уже можем производить дешевую продукцию. электричество в солнечных районах страны.Мы можем стать «Австралией Европы», производящей водород и аммиак ».

• О новаторской роли Iberdrola в ветроэнергетике:

  « Двадцать лет назад, сразу после подписания Киотского протокола, у нас было четкое зрение. Я начал работать в Ибердроле в начале 2001 года. Мы твердо верили, что изменение климата представляет собой реальную угрозу, и все секторы должны быть так или иначе задействованы. Следовательно, нам нужно было изменить способ производства и потребления энергии – [это] для нас было тем, что, как мы понимали, уже было очень необходимо.Когда мы [построили] наш первый завод, мы проанализировали наши технологии. Мы увидели, что в тот момент самой эффективной технологией был ветер; ветер был самой удобной и самой конкурентоспособной технологией.

  «В течение 20 лет многие люди скептически относились к нашему плану. Не многие верили, что то, что мы делаем, имеет смысл. Регулирующие органы сказали [о зеленой энергии]:« Нет, электричество не имеет цвета ». Конкуренты сказали, что ветер никогда когда это необходимо, инвесторы думали, что моделью [для подражания] является Enron.Многие люди были против во всех смыслах. Но мы очень соответствовали нашей стратегии; мы боролись за нашу стратегию, закрывая угольные электростанции, закрывая нефтяные электростанции, в некоторых случаях против правительства. И там, где мы находимся сегодня, совершенно другая ситуация.

  «Мы твердо верили, что все может измениться, изменение климата затронет всех, и каждый должен будет предоставить ресурсы, знания [и] возможности для преобразования вещей по-другому. Мы были убеждены, что мы можем производить и генерировать электроэнергию в конкурентоспособным образом с более чистыми источниками, и мы можем распределять электроэнергию с помощью более разумных сетей.Это была наша модель в течение этих 20 лет ».

• Об инновационном мышлении Iberdrola в отношении энергетического перехода:

  « Наш подход не изменился за 20 лет. Мы были настолько убеждены, что декарбонизация экономики уже возможна … Существуют технологии, такие как оффшорные [ветряные], которые могут играть большую роль в базовой нагрузке. Это одна из причин, почему [в] моих обсуждениях с регулирующими органами в некоторых странах они хотят, чтобы угольные электростанции работали.Оффшор уже может предоставить базовую нагрузку. Оффшор может легко получить 5 000 [киловатт] часов в год, что практически является базовой нагрузкой. Каждый день всегда дует ветер с моря на материк. Если вы разместите оффшор, плюс хранилище, плюс солнечная фотоэлектрическая энергия, которая уже достигает пика в середине дня … вы можете полностью обеспечить надежность, которая требуется системе.

  «Мы должны быть очень новаторскими. Мы должны убедиться, как интегрировать все эти вещи с надлежащей сетью, с надлежащей линией передачи, с надлежащей интеллектуальной цифровой системой – как управлять этими [поставками] со спросом.Всем этим нужно управлять очень новаторски. Вот почему мы инвестируем 400 миллионов долларов в год в инновации, чтобы попытаться увидеть, как мы можем [оптимизировать] использование этой электроэнергии для предоставления прямых услуг клиентам ».

• Об обязательствах Iberdrola перед США market:

  «Мы работаем в США почти 15 лет. Это наша основная страна. [В] нашем инвестиционном плане более 30 миллиардов долларов будет направлено в Соединенные Штаты из 75 миллиардов долларов, которые являются [основным] местом назначения.Мы работали с различными федеральными администрациями, и мы уже работаем в 25 штатах, в каждом из которых есть разные администрации ».

• О роли природного газа и ядерной энергии в энергетическом переходе:

  « Природный [газ ] играет определенную роль в этот переходный период. Электростанции [которыми мы владеем] решили работать [на газе] в основном в качестве базовой нагрузки. Их собираются использовать в качестве резервных. Мы видели в некоторых странах, [что] по мере увеличения доли возобновляемых источников энергии часы работы газовых электростанций сокращаются.Это больше резервное копирование, чем само производство, но все же необходимо сыграть свою роль в поддержании работоспособности системы.

  «Сегодня инвестиции, необходимые для атомной электростанции, намного выше, чем для любого другого решения. Ядерная энергия уже требует переменных затрат, уран имеет свою стоимость, эксплуатация и обслуживание очень дороги, а ядерные отходы стоят больших денег. В целом это имеет определенный недостаток [по сравнению с другими технологиями, которые не имеют переменных затрат – солнечной и ветровой, – без ядерных отходов и очень низкими эксплуатационными расходами и расходами на техническое обслуживание.У нас довольно много атомных электростанций. Мы уже достигли договоренностей о закрытии существующих в период с 2028 по 2033 год ».

• О социальных дивидендах ESG и Iberdrola:

  « Много лет назад я ввел в наш устав понятие «социальный дивиденд». Социальный дивиденд означает многое: что мы делаем с точки зрения окружающей среды, что мы делаем с точки зрения социальных [аспектов] и что мы делаем с точки зрения управления. Абсолютно согласен с этой концепцией.С точки зрения окружающей среды меня беспокоит только одно: меньше говорить о процентах и ​​больше говорить о числах.

  «В социальном плане мы очень хорошо осведомлены. Мы поддерживаем 400 000 человек через наших поставщиков и продавцов, многие [из них] озабочены своей работой. Мы продвигали заказы на следующие три года [чтобы помочь им] в выполнении работ. свою работу.

  «[О] равенстве между женщинами и мужчинами – когда я пришел на работу, там была одна женщина на руководящей должности. На данный момент мы почти половина с половиной; почти половина членов моего совета директоров – женщины, и они возглавляют большинство комитетов совета.Что касается корпоративного управления, мы не являемся владельцами компании. Мы администрируем ресурсы сторон. Мы должны обеспечить полную прозрачность и все средства, а также показать, что деньги, которые они вкладывают в наши руки, используются должным образом и не используются в интересах немногих, а используются на благо всех ». .com / беседы

  История продолжается

  Около Беседы CERAWeek:

  Беседы CERAWeek содержат оригинальные интервью и обсуждения с лидерами энергетической отрасли, правительственными чиновниками и политиками, лидерами технологических, финансовых и промышленных сообществ, а также новаторы в области энергетических технологий.

  Серия создана командой IHS Markit, ответственной за ведущую в мире энергетическую конференцию CERAWeek.

  Новые взносы будут добавляться еженедельно на сайте www.ceraweek.com/conversations.

  Недавние сегменты также включают:

  • Диалог лидерства с Вики Холлуб – президентом и главным исполнительным директором компании Occidental, опрошенным вице-председателем IHS Markit Дэниелом Ергином

  • Перспективы после выборов: энергетика, климат и геополитика – Меган Л.О’Салливан, профессор международных отношений Джин Киркпатрик, Гарвардский университет; Атул Арья, главный энергетический стратег IHS Markit; Нариман Бехравеш, главный экономист, IHS Markit. Модератор – старший вице-президент IHS Markit Карлос Паскуаль

  • Растущая доля газа в энергетическом балансе Индии: что реально? – Мэг Джентл, президент и главный исполнительный директор Tellurian Inc .; Манодж Джайн, председатель и управляющий директор GAIL India Ltd.; Эрни Трэшер, генеральный директор и директор по маркетингу Xcoal Energy & Resources.Модерирует Майкл Стоппард, главный стратег IHS Markit

  • Indian Energy Innovation – Сиддхарт Мейур, основатель и управляющий директор, h3e Power Systems Pvt. Ltd .; Суручи Рао, соучредитель Ossus Biorenewables; Виджей Сваруп, вице-президент по исследованиям и разработкам ExxonMobil Research & Engineering Company. Модерирует Атул Арья, старший вице-президент и главный энергетический стратег IHS Markit

  • Диалог руководства с Тенгку Мухаммад Тауфик – президент и главный исполнительный директор компании PETRONAS, опрошенный вице-председателем IHS Markit Даниэлем Ергином

  Доступна полная видеотека на www.ceraweek.com/conversations.

  О компании IHS Markit (www.ihsmarkit.com)

  IHS Markit (NYSE: INFO) – мировой лидер в области критически важной информации, аналитики и решений для основных отраслей и рынков, влияющих на мировую экономику. Компания предоставляет информацию, аналитику и решения нового поколения для клиентов в сфере бизнеса, финансов и правительства, повышая их операционную эффективность и обеспечивая глубокую аналитическую информацию, которая позволяет принимать обоснованные и уверенные решения.У IHS Markit более 50 000 корпоративных и государственных клиентов, в том числе 80 процентов компаний из списка Fortune Global 500 и ведущих финансовых организаций мира. IHS Markit со штаб-квартирой в Лондоне стремится к устойчивому и прибыльному росту.

  IHS Markit является зарегистрированным товарным знаком IHS Markit Ltd. и / или ее дочерних компаний. Все другие названия компаний и продуктов могут быть товарными знаками соответствующих владельцев © 2020 IHS Markit Ltd. Все права защищены.

  Посмотреть исходную версию на businesswire.com: https://www.businesswire.com/news/home/20201203005715/en/

  Контакты

  Джефф Марн
  IHS Markit
  +1 202463 8213
  [email protected]

  Пресс-служба
  +1 303 858 6417
  [email protected]

  CdtA, CdtB и CdtC образуют трехкомпонентный комплекс, необходимый для цитолетальной активности расширяющегося токсина

  РЕЗЮМЕ

  Campylobacter jejuni кодирует цитотоксический токсин, расширяющий цитотоксичность (CDT), который вызывает остановку клеток в переходной фазе G ₂ / M клеточного цикла.Токсины с высокой степенью родства также продуцируются другими важными бактериальными патогенами. Активность CDT требует функции трех генов: cdtA, cdtB и cdtC . Недавние исследования установили, что CdtB является активной субъединицей CDT, проявляя свой эффект как нуклеаза, которая повреждает ДНК и запускает остановку клеточного цикла. Микроинъекция CdtB в клетки-мишени приводила к остановке G ₂ / M и растяжению цитоплазмы, что неотличимо от того, что вызвано лечением CDT.Несмотря на этот прогресс, ничего не известно о составе голотоксина CDT или функции CdtA и CdtC. Мы показываем здесь, что при индивидуальном применении очищенные CdtA, CdtB или CdtC не проявляют токсической активности. Напротив, CdtA, CdtB и CdtC при объединении взаимодействуют друг с другом с образованием активного трехкомпонентного голотоксина, который проявляет полную клеточную токсичность. CdtA имеет домен, который имеет сходство с B-цепью токсинов, связанных с рицином. Поэтому мы предположили, что CDT представляет собой трехкомпонентный токсин, состоящий из CdtB в качестве ферментативно активной субъединицы и из CdtA и CdtC в качестве гетеродимерной субъединицы B, необходимой для доставки CdtB.

  Campylobacter jejuni – основная причина бактериальных болезней пищевого происхождения в США и Европе (21). Несмотря на его большое значение для здоровья человека, о его патогенезе известно относительно мало (34). Такая нехватка знаний, вероятно, связана с относительно недавним признанием C. jejuni в качестве важного патогена для человека (6, 30), отсутствием простых моделей на животных, облегчающих его изучение (9, 31), недостатком доступных генетические инструменты для создания случайных мутантов (10) или сочетание этих и других факторов.Очень важным событием в исследовании Campylobacter стало недавнее завершение определения полной нуклеотидной последовательности его генома (24). Несмотря на это значительное достижение, известно или предсказано, что всего несколько генов C. jejuni непосредственно участвуют в вирулентности. Одним из этих факторов является токсин, расширяющий цито летальный исход (CDT), который вызывает остановку эукариотических клеток в фазе перехода G ₂ / M клеточного цикла (25, 33). Помимо C.jejuni , CDT также были описаны у других важных бактериальных патогенов, таких как Campylobacter coli (15), Campylobacter fetus (15), Shigella spp. (23), Haemophilus ducreyi (3), Actinobacillus actinomycetemcomitans (32), Helicobacter hepaticus (35) и некоторые патогенные штаммы Escherichia coli (16, 28). Клетки, отравленные CDT, демонстрируют характерное растяжение цитоплазмы, увеличение содержания ДНК и накопление неактивной, фосфорилированной тирозином формы Cdc2, ключевого регулятора развития клеточного цикла (2, 5, 29, 33).

  CDT кодируется тремя генами: cdtA, cdtB и cdtC , которые необходимы для цитотоксичности (26). Недавние исследования позволили лучше понять механизм действия этого токсина. Элвелл и Дрейфус (7) и Лара-Теджеро и Галан (19) сообщили, что CdtB демонстрирует поразительное сходство аминокислотной последовательности с представителями семейства белков ДНКазы I. Сходство аминокислотной последовательности ограничено рядом остатков, которые, как показали мутагенез и структурный анализ, необходимы для нуклеазной активности (8, 18, 20).Мутации в этих остатках полностью аннулировали активность CDT (7, 19). Эти результаты в сочетании с наблюдением, что очищенный CdtB проявляет нуклеазную активность in vitro, привели к гипотезе о том, что CDT проявляет свой эффект, повреждая ДНК, тем самым запуская контрольную точку контроля клеточного цикла, которая приводит к остановке G ₂ / M. Действительно, было показано, что временная экспрессия CdtB в клетках-хозяевах приводит к катастрофическим изменениям хроматина (19). Что еще более важно, CdtB при микроинъекции в клетки-хозяева сам по себе был способен воспроизводить все токсические эффекты голотоксина CDT, включая задержку G ₂ / M и растяжение цитоплазмы (19).

  Хотя эти недавние исследования продемонстрировали, что CdtB является активной субъединицей CDT, ничего не известно о составе голотоксина CDT и функции CdtA и CdtC (26). Например, неизвестно, являются ли CdtA и / или CdtC компонентами предполагаемого голотоксина CDT или эти белки играют роль в секреции и / или транслокации в клетки-мишени активной субъединицы. Исследованию CDT препятствовали трудности с его выделением (26). Эти технические трудности в сочетании с очевидной высокой удельной активностью токсина привели к нескольким противоречивым сообщениям, которые невозможно согласовать друг с другом.Например, в некоторых сообщениях указано, что CdtB (29) или CdtC (27) сами по себе могут вызывать токсические эффекты. Однако ни один из этих отчетов не смог продемонстрировать, что препараты, использованные в исследованиях, не содержали других компонентов токсина.

  Мы сообщаем здесь, что очищенные CdtA, CdtB или CdtC не проявляют токсической активности при нанесении на клетки по отдельности. Однако CdtA, CdtB и CdtC при объединении взаимодействуют друг с другом с образованием активного трехкомпонентного голотоксина.

  МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

  Бактериальные штаммы, среды, условия роста и плазмидные конструкции. E. coli DH5α был штаммом-хозяином для рекомбинантной экспрессии CDT. E. coli M15 (pREP4) был штаммом-хозяином для экспрессии рекомбинантных CdtA-His ₆ и CdtC-His ₆ . Экспрессию глутатиона S -трансферазы (GST) –CdtA и GST-CdtB проводили в E. coli BL21 (DE3). Плазмиды, альтернативно экспрессирующие оперон cdt с одним из трех белков Cdt, меченных на своем С-конце эпитопом, полученным из белка E4-6 / 7 аденовируса и распознаваемым моноклональным антителом M45 (22), были сконструированы с использованием стандартной молекулярной биологии. техники следующим образом.Основой вектора для всех трех конструкций был C-концевой вектор pSB616, маркирующий эпитоп M45 (1), который обеспечивает экспрессию клонированного оперона из строго регулируемого промотора P _BAD , который может быть индуцирован при добавлении арабинозы (11 ). Плазмида, кодирующая оперон cdt с меченной эпитопом M45 версией CdtA, была сконструирована путем клонирования амплифицированного с помощью ПЦР гена cdtA перед и в рамке с меткой M45 с использованием уникального сайта Nco I pSB616.ПЦР-амплифицированный сегмент ДНК, кодирующий cdtBC , был клонирован непосредственно после меченного эпитопом cdtA в уникальный сайт Sal I, давая плазмиду pSB1731. Плазмида, кодирующая оперон cdt с меченной эпитопом M45 версией cdtB , была сконструирована путем клонирования амплифицированного с помощью ПЦР фрагмента ДНК, кодирующего cdtAB в рамке с меткой M45 pSB616 с использованием уникального сайта Nco I. Затем сегмент ДНК, кодирующий cdtC , клонировали в сайте Sal I ниже эпитопной метки, в результате чего была получена плазмида pSB1735.Плазмида, кодирующая оперон cdt с версией M45 из cdtC , была сконструирована путем клонирования в рамке с меткой M45 амплифицированного с помощью ПЦР фрагмента ДНК, кодирующего cdtABC , в уникальный сайт Nco I pSB616 (рис. 1). показывает организацию этих оперонов, меченных эпитопом М45). Все гены были амплифицированы из хромосомной ДНК C. jejuni 81-176. Все плазмидные конструкции приводили к экспрессии различных субъединиц Cdt при индукции арабинозой и были такими же токсичными, как оперон дикого типа, что указывает на то, что присутствие меток эпитопа не влияет на функцию различных белков Cdt.Все меченные эпитопом белки легко обнаруживались вестерн-блоттингом с использованием моноклонального антитела против M45. Плазмиды, кодирующие отдельные субъединицы, меченные эпитопом Cdt, были сконструированы с помощью ПЦР-амплификации различных сегментов ДНК из хромосомной ДНК C. jejuni 81-176 и последующего клонирования в вектор-метку эпитопа pSB616. В результате этой процедуры были получены плазмиды pSB1723, pSB1382 и pSB1738, которые кодируют меченые эпитопом M45 версии CdtA, CdtB и CdtC соответственно.Плазмиды, кодирующие His ₆ -меченый CdtA или CdtC, лишенные своей сигнальной последовательности секреции, были сконструированы с помощью ПЦР-амплификации соответствующих фрагментов ДНК из хромосомной ДНК C. jejuni 81-176 и их последующего клонирования в вектор-метку pQE60 (Qiagen) в результате были получены плазмиды pSB1958 и pSB1961 соответственно. Плазмиды, кодирующие GST-меченный CdtA и GST-меченный CdtB без их сигнальной последовательности, были сконструированы с помощью ПЦР-амплификации соответствующих сегментов ДНК из C.jejuni 81-176 хромосомной ДНК и последующее клонирование их в вектор для мечения pGEX-KG (Pharmacia) с получением плазмид pSB1727 и pSB1953 соответственно.

  Рис. 1.

  Схема плазмидных конструкций, экспрессирующих меченые эпитопом М45 версии различных белков Cdt.

  Культура ткани. Клетки кишечного эпителия Henle-407 выращивали, как описано ранее (19), в среде Игла, модифицированной Дульбекко (DMEM), с добавлением 10% бычьей телячьей сыворотки (BCS) в атмосфере 5% CO ₂ .

  Анализ токсичности. Клетки эпителия кишечника Henle-407, засеянные при ~ 20% конфлюэнтности, обрабатывали в течение 2 ч 30 мкл каждой фракции колонки или серией двукратных разведений этих препаратов. После обработки клетки промывали фосфатно-солевым буфером (PBS) и добавляли свежую полную среду DMEM. Клетки наблюдали до 72 часов. Данное разведение считалось токсичным, если по крайней мере 50% клеток на чашке проявляли явные признаки интоксикации, что определялось характерным вздутием цитоплазмы и увеличением ядра.Титр токсичности был назначен как величина, обратная более высокому разведению, которое считалось токсичным.

  Очистка белка для анализа восстановления токсина. C-концевой His _{6 рекомбинантных белков CdtA и CdtC, меченных} , очищали, как следует, из телец включения, полученных из E. coli M15 (pREP4, pSB1958) и M15 (pREP4, pSB1961), соответственно. E. coli M15 (pREP4, pSB1958) и M15 (pREP4, pSB1961), кодирующие CdtA-His ₆ и CdtC-His ₆ , соответственно, выращивали на 1 литре 2 × TY с добавлением 25 мкг канамицина. и 100 мкг ампициллина на мл до оптической плотности при 600 нм (OD ₆₀₀ ) 0.От 6 до 0,7. Затем экспрессию CdtA-His ₆ и CdtC-His ₆ индуцировали добавлением 1 мМ IPTG (изопропил-β-d-тиогалактопиранозид), и культуры инкубировали в течение 5 часов, чтобы обеспечить экспрессию рекомбинантных белков. Затем бактериальные клетки собирали центрифугированием, промывали на холоде (PBS) при pH 7,4 и ресуспендировали в 10 мл лизирующего буфера (50 мМ NaH ₂ PO ₄ , 300 мМ NaCl, 10 мМ имидазол; pH 8). Клетки лизировали двумя проходами через французскую ячейку под давлением при 100000 кПа.Лизат клеток осветляли центрифугированием при 16000 об / мин в течение 30 минут для извлечения осадка, содержащего клеточный дебрис и тельца включения. Тельца включения солюбилизировали путем ресуспендирования в 10 мл солюбилизационного буфера (8 М мочевина, 100 мМ NaH ₂ PO ₄ , 10 мМ Трис; pH 8). Суспензию перемешивали при комнатной температуре не менее 1 часа. После инкубации солюбилизированный материал осветляли центрифугированием при 16000 об / мин в течение 30 мин. Супернатант, содержащий солюбилизированный белок, меченный His ₆ , переносили в коническую пробирку емкостью 14 мл, содержащую 1 мл гранул агарозы Ni-нитрилотриуксусной кислоты (Qiagen), и смесь инкубировали при осторожном покачивании в течение 1 ч при 4 ° C. .После связывания шарики осаждали центрифугированием при 1500 об / мин и пять раз промывали 10 мл ледяного промывочного раствора (8 М мочевина, 100 мМ NaH ₂ PO ₄ , 10 мМ Трис; pH 6,5). Элюцию белка проводили путем инкубации в течение 10 мин в 5 мл буфера для элюции (8 М мочевина, 100 мМ NaH ₂ PO ₄ , 100 мМ ЭДТА, 10 мМ Трис; pH 4,5). Процедуру элюирования повторяли пять раз, и все элюенты объединяли. Элюированный белок разбавляли до 0,1 мг / мл в буфере для солюбилизации и повторно укладывали диализом против буфера для ренатурализации (25 мМ Трис, pH 8; 200 мМ NaCl; 10% глицерин; 2 мМ ЭДТА; 5 мМ дитиотреитол [DTT]).После рефолдинга белок концентрировали с использованием концентратора Centriprep-10 (Amicon).

  N-концевой GST-меченный рекомбинантный белок CdtB очищали следующим образом. E. coli BL21 (DE3) (pSB1953) выращивали при 37 ° C в 1 литре 2 × TY с добавлением 100 мкг ампициллина на мл до OD ₆₀₀ 1,0. В этот момент экспрессию GST-CdtB индуцировали добавлением 1 мМ IPTG, и клетки инкубировали еще 5 ч при 30 ° C. После экспрессии рекомбинантного белка клетки собирали центрифугированием, промывали ледяным PBS и ресуспендировали в 10 мл лизирующего буфера (50 мМ Tris-HCl, pH 8; 200 мМ NaCl; 10 мМ DTT).Клетки лизировали двумя пассажами через ячейку под давлением Френча, и лизат осветляли, как описано выше. Затем к осветленному лизату добавляли 2 мл 50% суспензии гранул глутатион-сефарозы (Amersham Pharmacia) и смесь инкубировали в течение 1 ч при 4 ° C при осторожном покачивании. Гранулы промывали пять раз 10 мл лизирующего раствора, содержащего 500 мМ NaCl. Для высвобождения фрагмента CdtB гранулы инкубировали при комнатной температуре в течение 1 ч в 1 мл буфера для расщепления тромбина (50 мМ Трис-HCl, pH 8; 150 мМ NaCl; 2.5 мМ CaCl ₂ ), содержащий 2,5 ед. Тромбина. Супернатант, содержащий очищенный белок CdtB, переносили в свежую пробирку, и тромбин инактивировали добавлением 1 мМ фенилметилсульфонилфторида (PMSF). Количественную оценку очищенных рекомбинантных белков проводили электрофорезом в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия, окрашенным кумасси синим (SDS-PAGE), или с помощью набора для анализа белков Bio-Rad, используя известные количества бычьего сывороточного альбумина в качестве стандартов.

  Анализ клеточного цикла.Клетки кишечного эпителия Henle-407 слегка высевали на чашки для культивирования тканей диаметром 60 мм. Через 24 часа клетки обрабатывали разными образцами в течение 2 часов. Затем клетки промывали PBS и добавляли свежую полную среду DMEM. Через 56 ч после интоксикации клетки обрабатывали для проточной цитометрии следующим образом. Клетки удаляли из чашек с трипсином, который затем нейтрализовали средой, содержащей сыворотку. Суспензии клеток центрифугировали 5 мин при 1500 об / мин при комнатной температуре.Супернатанты удаляли, а осадки клеток ресуспендировали в 500 мкл PBS при комнатной температуре. Суспензии клеток добавляли по каплям в пробирку, содержащую 4 мл этанола при -20 ° C в качестве фиксатора при непрерывном встряхивании. Клетки выдерживали в фиксаторе не менее 2 ч на льду. Суспендированные в этаноле клетки собирали центрифугированием, и этанол тщательно декантировали. Гранулы ресуспендировали в 5 мл PBS и инкубировали в течение 5 мин, а клетки снова центрифугировали, как описано выше.Осадки клеток ресуспендировали в 1 мл раствора, содержащего 0,1% Triton X-100, 20 мг РНКазы A, не содержащей ДНКазы, и 20 мкг йодида пропидия (Molecular Probes) на 1 мл в PBS. Окрашенные клетки анализировали проточной цитометрией с помощью проточного цитометра FACStar Plus (Beckton Dickinson).

  GST-анализы с пониженным содержанием. N-концевые GST-меченные белки CdtA и CdtB, используемые в GST-слияниях, очищали, как описано выше, за исключением того, что слитые белки элюировали из шариков путем инкубации в течение 10 минут в 1 мл элюирующего буфера (50 мМ Tris -HCl, pH 8.0; 200 мМ NaCl; 10 мМ DTT; 5 мМ восстановленный глутатион). Процедуру элюирования повторяли пять раз; элюаты объединяли и концентрировали, используя концентратор Centricon-10 (Amicon), который также удалял глутатион из очищенного белка. Количественное определение рекомбинантных очищенных белков проводили с помощью SDS-PAGE, окрашенного кумасси синим, с использованием известных количеств бычьего сывороточного альбумина в качестве стандартов.

  Ночные культуры штаммов E. coli , несущие каждую из плазмид, кодирующих версии различных белков Cdt с меткой эпитопа M45 в контексте оперонов cdt , разводили 1:50 в 25 мл бульона Luria, содержащего 100 мкг. ампициллина на мл.Культуры выращивали при 37 ° C со встряхиванием до OD ₆₀₀ от 0,5 до 0,6. Экспрессию оперонов индуцировали добавлением 0,02% арабинозы, и культуры инкубировали в течение дополнительных 4 часов. Затем клетки собирали центрифугированием при 10000 об / мин в течение 30 минут. Супернатанты отбрасывали, а осадки клеток ресуспендировали в 250 мкл PBS, содержащего 0,1% NP-40 и 1 мМ PMSF. Клетки лизировали обработкой ультразвуком, лизаты осветляли центрифугированием при 14000 об / мин в течение 30 минут и супернатанты переносили в свежую пробирку.Реакции связывания инициировали добавлением 20 мкг соответствующего слитого белка GST к разведению 1:10 бактериальных лизатов в PBS, содержащем 0,1% NP-40, в конечном объеме 750 мкл. Смеси инкубировали в течение 3 ч при 4 ° C в условиях мягкого покачивания. Затем к каждой из смесей добавляли 50 мкл 50% взвеси гранул глутатион-сефароза, и образцы инкубировали в течение 1 ч в тех же условиях. Гранулы осаждали центрифугированием при 7500 об / мин в течение 1 мин и четыре раза промывали в 1 мл PBS, содержащего 0.1% НП-40. Гранулы загружали в 10% гель SDS-PAGE вместе с образцами лизата до и после инкубации. Связанные белки выявляли иммуноблоттингом против M45.

  Анализы коиммунопреципитации. Лизаты штаммов E. coli , несущих каждую из плазмид, кодирующих версии различных белков Cdt с меткой эпитопа M45 в контексте оперонов cdt , получали, как описано выше. Соответствующие кроличьи антисыворотки, направленные к различным белкам Cdt, добавляли к различным образцам при конечном разведении 1: 100, и смеси хранили на льду в течение 90 минут с периодическим перемешиванием.Затем к реакциям связывания добавляли 50 мкл взвеси протеина A-сефарозы, и образцы инкубировали еще 90 мин при 4 ° C с осторожным покачиванием. Гранулы промывали четыре раза 1 мл PBS, содержащего 0,1% NP-40, ресуспендировали в загрузочном буфере Лэммли, кипятили в течение 5 минут и загружали в 10% SDS-полиакриламидный гель вместе с образцами лизата до и после инкубации. Связанные белки детектировали вестерн-иммуноблоттингом с моноклональным антителом против M45.

  Анализ комплексообразования гель-фильтрацией.Каждый из очищенных белков Cdt по отдельности загружали в колонку для гель-фильтрации Superdex 200 (SD200) (Amershan Pharmacia), предварительно уравновешенную 25 мМ Трис (pH 8) –200 мМ NaCl. Собирали фракции (1 мл) и 25 мкл каждой фракции анализировали с помощью SDS-PAGE и окрашивания кумасси синим. Фракции, содержащие каждый из очищенных белков Cdt, смешивали в эквимолярных концентрациях и инкубировали в течение 90 мин при комнатной температуре для образования комплекса. После инкубации комплекс загружали в колонку SD200 и собирали фракции объемом 1 мл, как описано выше.Затем монослои кишечных эпителиальных клеток Henle-407 обрабатывали 50 мкл серии двукратных разведений соответствующих фракций (от 13 до 18) для количественного определения активности CDT. Кроме того, 200 мкл тех же фракций анализировали с помощью SDS-PAGE и окрашивания кумасси синим.

  Сравнение аминокислотных последовательностей. Распределение аминокислотных последовательностей проводили с помощью программы THREADER2 (17). Когда CdtA сравнивался с библиотекой с более чем 1900 кратностями, цепь B рицина заняла первое место с очень значимым Z-показателем (4.24 e-3), что четко отличало его от всех других белков.

  РЕЗУЛЬТАТЫ

  Восстановление голотоксина CDT очищенными компонентами Cdt. Активность CDT требует функции CdtA, CdtB и CdtC. Недавно мы показали, что микроинъекция небольших количеств (раствор 1 мкг / мл) очищенного CdtB в цитоплазму культивируемых клеток может повторять все цитотоксические эффекты CDT, такие как остановка клеточного цикла и растяжение цитоплазмы (19). Эти результаты показали, что CdtB является ферментативно активным компонентом голотоксина.Однако вклад CdtA и CdtC в активность CDT неизвестен. Один или оба этих белка могут участвовать в транслокации CdtB в эукариотическую клетку и / или могут играть исключительную роль в бактериальной клетке в процессах, модификации, сборке или секреции активного голотоксина. Чтобы понять некоторые из этих проблем, мы исследовали возможность восстановления активности CDT из очищенных компонентов. Очистка отдельных белков Cdt оказалась очень сложной задачей, поскольку основная часть этих белков остается тесно связанной с бактериальной оболочкой (13).Кроме того, количества токсина, присутствующего в супернатантах культур, недостаточно для значимых биохимических экспериментов. Эти особенности, в сочетании с чрезвычайно высокой специфической активностью CDT, в значительной степени являются причиной часто противоречивых сообщений в литературе, приписывающих функции отдельным компонентам токсина. Чтобы обойти эти проблемы, мы оптимизировали экспрессию и очистку отдельных рекомбинантных белков Cdt с использованием различных систем экспрессии E. coli .CdtA и CdtC очищали как C-концевые белки, меченные His ₆ , без сигнальной последовательности. CdtB очищали как N-концевое слияние с GST, также без его сигнальной последовательности. Все препараты были растворимы и имели чистоту> 95% (рис. 2). Экспрессия и очистка каждого белка Cdt индивидуально гарантирует отсутствие перекрестного загрязнения. Очищенные белки Cdt затем использовали в экспериментах, чтобы определить, можно ли восстановить токсичность очищенных компонентов. Обработка эпителиальных клеток кишечника Henle-407 CdtA, CdtB или CdtC не привела к токсичности (рис.3). Эти результаты резко контрастируют с предыдущими сообщениями, показывающими, что очищенный CdtC (27) или CdtB (29) сохраняют токсическую активность. Поскольку микроинъекция очищенного CdtB может повторять все эффекты CDT (19), эти результаты предполагают, что для доставки CdtB в клетки-мишени может потребоваться функция других белков Cdt. Чтобы исследовать эту возможность, мы обрабатывали клетки CdtB в сочетании с CdtA или CdtC. Как показано на фиг. 3, ни одна из комбинаций не привела к обнаруживаемой токсичности.Однако обработка клеток Henle-407 комбинацией трех индивидуально очищенных компонентов приводила к полному проявлению токсичности, такой как явное растяжение цитоплазмы и остановка клеточного цикла G ₂ / M (фиг. 3). Эти результаты показывают, что CdtA и CdtC необходимы для доставки активной субъединицы CdtB в целевую клетку.

  Рис. 2.

  Очищенные белки Cdt. Рекомбинантные белки Cdt очищали, как указано в разделе «Материалы и методы», обрабатывали на полиакриламидном геле и окрашивали кумасси синим.

  Рис. 3.

  Влияние очищенных белков Cdt на культивируемые эпителиальные клетки кишечника. Очищенные белки Cdt по отдельности или в комбинации (как указано) добавляли в концентрации 10 мкг / мл к культуре кишечных клеток Henle-407. Через 72 часа после добавления белков клетки исследовали под фазовым микроскопом или обрабатывали для измерения содержания ДНК с помощью проточной цитометрии, как указано в разделе «Материалы и методы». Масштабная линейка на микрофотографиях культивированных клеток кишечника, обработанных различными образцами, составляет 50 мкм.

  Белки Cdt взаимодействуют друг с другом. Три белка Cdt необходимы для восстановления токсичности CDT, что указывает на то, что CdtA и CdtC должны играть роль в транслокации CdtB в клетку-мишень. Следовательно, возможно, что эти белки или их часть могут взаимодействовать друг с другом с образованием комплекса до доставки активной субъединицы в клетку. Чтобы рассмотреть эту возможность, мы исследовали потенциальное взаимодействие различных белков Cdt в нескольких экспериментах по связыванию in vitro.Сначала мы исследовали взаимодействие CdtB, активной субъединицы, с CdtA и CdtC с помощью анализа GST с понижением. CdtA-M45 и CdtC-M45 легко связываются с GST-CdtB, но не с GST (рис. 4). И наоборот, GST-CdtA, но не GST, мог взаимодействовать с CdtB-M45. Эти взаимодействия были дополнительно подтверждены анализами коиммунопреципитации с использованием специфических антител и лизатов E. coli , экспрессирующих три белка Cdt (фиг.5). Антитело, направленное на CdtA, иммунопреципитировавшее CdtC, и, наоборот, антитело, направленное на CdtC, снижало CdtA (рис.5). Кроме того, антитело против CdtB было способно снижать уровень CdtA (рис. 5). Во всех случаях предиммунные антисыворотки не иммунопреципитировали ни один из этих белков (рис. 5). Взятые вместе, эти результаты показывают, что три белка Cdt способны взаимодействовать друг с другом и, следовательно, могут образовывать комплекс.

  Рис. 4. Анализ

  GST для взаимодействий с белками Cdt. Цельноклеточные лизаты E. coli , экспрессирующие cdt оперонов, кодирующих меченные эпитопом M45 белки CdtA, CdtB или CdtC (как указано слева от каждой панели), зондировали очищенным GST-CdtB, GST-CdtA или GST (в качестве отрицательного контроля), как указано под каждой панелью.Белки Cdt в образцах до (Pre) и после (Post) подтягивания или связанные с гранулами глутатион-агарозы (осадок) были обнаружены вестерн-блоттингом с моноклональным антителом, направленным на метку эпитопа M45. Уровни CdtB в лизатах E. coli были недостаточными для его обнаружения в образцах до или после удаления без предварительного концентрирования. Однако осаждение GST-CdtA привело к концентрации CdtB, что позволило его обнаружить в образце.

  Рис.5.

  Анализы коиммунопреципитации для взаимодействий с белками Cdt. Цельноклеточные лизаты E.coli , экспрессирующие различные меченные эпитопом M45 белки Cdt в комбинации с другими немечеными белками Cdt (как указано в верхней части каждой панели), подвергали анализу коиммунопреципитации с кроличьими поликлональными антителами, специфичными к различным белкам Cdt ( как указано под каждой панелью). Меченные эпитопом M45 белки Cdt в образцах до (Pre-IP) и после (Post-IP) иммунопреципитации или связанные с гранулами протеина A-сефарозы (осадок) обнаруживали вестерн-блоттингом с моноклональным антителом, направленным на эпитоп M45.В качестве контроля специфичности антител лизаты, экспрессирующие только различные меченные эпитопом белки Cdt (как указано в верхней части последних трех дорожек каждой панели), обрабатывали поликлональными антителами против Cdt (как указано ниже последних трех дорожек). каждой панели), и иммунопреципитаты анализировали вестерн-блоттингом с моноклональным антителом M45. Preimm., Преиммунная сыворотка.

  CdtA, CdtB и CdtC образуют трехкомпонентный комплекс. Предыдущая серия экспериментов предположила, что три белка Cdt могут быть организованы в трехчастный комплекс, поскольку все они необходимы для восстановления токсичности CDT, и они могут взаимодействовать друг с другом в Анализ GST и коиммунопреципитации.Поэтому мы исследовали эту возможность непосредственно с помощью гель-фильтрационной хроматографии. Сначала мы определили пики элюирования индивидуально очищенных рекомбинантных белков Cdt, загруженных на колонку для гель-фильтрации SD200. CdtA и CdtB элюировались во фракциях 16 и 17, которые соответствуют профилям элюирования белков с их предсказанными молекулярными массами (29 919,36 кДа для CdtA и 28 972,97 кДа для CdtB). CdtC, прогнозируемая молекулярная масса которого составляет 21 157 кДа, элюируется во фракциях с 14 по 16, которые соответствуют профилю элюирования белка большего размера, что указывает на то, что по крайней мере часть CdtC может мультимеризоваться в растворе.Затем очищенные протеины, подвергнутые гель-фильтрации, смешивали в эквимолярных соотношениях и инкубировали при комнатной температуре в течение 90 мин, чтобы дать возможность образоваться предполагаемому комплексу. Затем смесь загружали в ту же колонку SD200 и элюированные фракции контролировали с помощью SDS-PAGE и окрашивания кумасси синим. Белки Cdt элюируются во фракциях, соответствующих приблизительной молекулярной массе ~ 80 кДа, что согласуется с образованием трехкомпонентного комплекса, состоящего из CdtA, CdtB и CdtC (рис. 6).Что еще более важно, профили элюирования CdtA и CdtB были смещены от их исходного мономерного положения во фракциях 16 и 17 к фракциям 14 и 15, что соответствует образованию такого комплекса (рис. 6). Токсичность различных фракций тестировали на эпителиальных клетках кишечника Henle-407. В соответствии с образованием активного токсинового комплекса, самая высокая удельная активность была связана с фракцией 14, после чего резко снизилась, и почти не было обнаружено токсической активности во фракции 17 и выше.Кроме того, токсичность коррелировала с присутствием трех белковых компонентов Cdt. Взятые вместе с экспериментами по взаимодействию белок-белок, эти результаты показывают, что CdtA, CdtB и CdtC образуют трехкомпонентный комплекс, который обладает токсичностью.

  Рис. 6.

  Гель-фильтрационная хроматография белков Cdt. Очищенные белки Cdt по отдельности или в комбинации загружали в колонку для гель-фильтрации Superdex 200, как указано в разделе «Материалы и методы». Затем фракции объемом 1 мл собирали и исследовали с помощью SDS-PAGE и окрашивания кумасси синим.На полосы белков наложены профили хроматографического поглощения. Если указано, токсичность исследовали, как описано в разделе «Материалы и методы», с использованием 50 мкл каждой фракции. Индекс токсичности представляет собой обратное значение разведения каждого образца, которое вызвало видимые морфологические изменения в культуре кишечных клеток Henle-407.

  ОБСУЖДЕНИЕ

  Хорошо известно, что активность CDT C. jejuni и других грамотрицательных патогенов требует функции трех белков: CdtA, CdtB и CdtC (25, 28).Однако индивидуальный вклад каждого из этих белков в токсичность CDT был предметом противоречивых отчетов (27, 29). Кроме того, оставалось неясным, образуют ли различные белки Cdt часть голотоксина CDT или играют неизвестную роль в секреции и / или процессинге предполагаемой активной субъединицы (ей). Некоторые из этих вопросов были недавно прояснены, когда было показано, что микроинъекция очищенного CdtB в клетки-мишени может воспроизводить все эффекты, наблюдаемые в клетках, обработанных CDT (19).Также сообщалось, что CdtB проявляет сходство аминокислотной последовательности с белками типа ДНКазы I и обладает нуклеазной активностью in vitro (7, 19). Эти наблюдения показывают, что нуклеазная активность CdtB повреждает ДНК клетки-мишени, вызывая контрольную точку клеточного цикла, которая вызывает задержку G ₂ / M, характерную для интоксикации CDT (7, 19). Таким образом, эти результаты указывают на то, что CdtB фактически является активной или «A» субъединицей CDT. Мы расширили эти исследования здесь и показали, что CdtA, CdtB и CdtC образуют трехкомпонентный активный комплекс, который составляет голотоксин CDT.

  Было несколько противоречивых сообщений об индивидуальном вкладе каждого белка Cdt в токсичность CDT (27, 29). Скорее всего, эти противоречивые результаты являются следствием высокой специфической активности токсина CDT в сочетании с присущей ему трудностью очистки белков Cdt из-за их тенденции связываться с внешней мембраной бактерий (13). Эти препятствия сделали практически невозможным делать выводы из экспериментов, проведенных с отдельными белками Cdt, выделенными из бактерий, экспрессирующих все гены cdt , поскольку незначительное загрязнение может привести к ошибочным результатам.Чтобы избежать этих ловушек, мы очистили каждый рекомбинантный белок Cdt из E. coli , экспрессирующий каждый отдельный ген cdt , тем самым избегая потенциальных проблем, которые могут возникнуть из-за перекрестного заражения субъединиц. Обработка клеток очищенным CdtB не привела к обнаруживаемой токсичности. Поскольку микроинъекция того же препарата CdtB привела к токсичности (19), эти результаты показали, что эта субъединица сама по себе не может достичь внутриклеточного компартмента, чтобы проявить свой токсический эффект.Следовательно, эти результаты также предполагают, что CdtA, CdtC или оба могут быть необходимы для клеточной транслокации CdtB. Обработка клеток комбинацией CdtB и либо CdtC, либо CdtA не приводила к токсичности. Однако обработка клеток смесью индивидуально очищенных CdtA, CdtB и CdtC вызвала изменения, идентичные изменениям, вызванным экстрактами бактерий, экспрессирующих оперон cdt дикого типа. Эти изменения включали типичное растяжение цитоплазмы, увеличение ядер и остановку G ₂ / M.Эти результаты показывают, что три белка необходимы для токсичности и что активный токсин может быть восстановлен из индивидуально очищенных компонентов. Эти результаты также предполагают, что CdtA и CdtC, скорее всего, участвуют не в секреции CdtB (активной субъединицы), а скорее в его доставке в клетку-хозяин.

  Восстановление токсичности CDT с помощью комбинации трех белков Cdt предполагает возможность того, что эти три белка действительно были субъединицами трехкомпонентного голотоксина.Кроме того, Purven et al. показали, что CDT, очищенные из бактериальных экстрактов с использованием моноклональных антител, направленных против CdtC, проявляют полную токсичность (27). Поскольку CdtB необходим для токсичности CDT, эти результаты также согласуются с представлением о том, что белки Cdt образуют активный комплекс. Наши результаты показали, что это так. Было показано, что CdtA, CdtB и CdtC взаимодействуют друг с другом с помощью различных анализов взаимодействия белок-белок, и полностью токсичный трехкомпонентный комплекс, состоящий из трех белков Cdt, был выделен с помощью гель-фильтрационной хроматографии.Эти результаты предполагают, что CDT представляет собой токсин AB ₂ , состоящий из CdtB в качестве ферментативно активной (A) субъединицы и CdtA и CdtC в качестве гетеродимерной субъединицы B, необходимой для доставки CdtB в клетку-мишень. Также в поддержку этой гипотезы мы обнаружили в CdtA, используя нити аминокислотной последовательности, область, охватывающую аминокислоты 160-220, которая проявляет сходство с лектиновой складкой, присутствующей в B-цепи рицина и абрина, двух хорошо охарактеризованных токсинов AB. (12). Аналогичное наблюдение было сделано Hofmann et al.используя другой подход (14). Субъединица В рицина связывается с остатками галактозы рецепторных гликопротеинов, облегчая проникновение субъединицы А в цитозоль клетки-мишени посредством рецептор-опосредованного эндоцитоза. Недавно сообщалось, что CDT проникает в клетки через ямки, покрытые клатрином, что согласуется с рецепторно-опосредованным процессом (4). Следовательно, возможно, что CdtA, возможно, в ассоциации с CdtC, может направлять транслокацию CdtB посредством взаимодействия с клеточным рецептором. В настоящее время проводятся эксперименты по изучению этой возможности.

  Таким образом, эти исследования показывают, что CDT представляет собой трехкомпонентный токсин, состоящий из CdtB в качестве ферментативно активной субъединицы и CdtA и CdtC, необходимых для доставки CdtB. Такой состав предполагает, что CDT представляет собой гетеродимерный токсин AB ₂ .

  БЛАГОДАРНОСТИ

  Мы благодарим M. Blaser за бактериальные штаммы и плазмиды и Erec Stebbins за полезные обсуждения и помощь в очистке Cdt.

  Примечания

  Редактор: В. Дж. ДиРита

  Примечания

  • Поступило 1 февраля 2001 г.
  • Возвращено для модификации 28 марта 2001 г.
  • Принято 9 апреля 2001 г.
  • Авторские права © 2001 Американское общество микробиологов

  SOLEA Sleep Snoring Therapy San Jose CA

  Что такое сон SOLEA?

  SOLEA® Sleep улучшает качество сна, мягко стягивая ткани мягкого неба и уменьшая вибрации, вызывающие храп. В отличие от хирургических процедур, требующих длительного и болезненного восстановления, SOLEA Sleep – это быстрая, удобная, нехирургическая процедура, которая выполняется за одно посещение.Наслаждайтесь быстрым избавлением от храпа для вас и вашего партнера.

  Что вызывает храп?

  Основным источником храпа является вибрация, которая может возникать, когда воздух проходит мимо расслабленных тканей мягкого неба. Эти ткани могут стать еще более расслабленными с возрастом или увеличением веса.

  Насколько серьезен храп?

  Храп часто является симптомом обструктивного апноэ во сне, серьезного состояния, которое может быть опасным для жизни. Стоматолог не может диагностировать апноэ во сне, поэтому мы рекомендуем вам проконсультироваться с врачом для дальнейшего обследования.SOLEA Sleep – это средство только от храпа.

  Глубина поглощения лазера SOLEA

  Лазеры на диоксиде углерода, такие как SOLEA, обеспечивают идеальную глубину поглощения 30–100 мкм для быстрого и эффективного воздействия на собственную пластинку без повреждения нижележащих слоев ткани нежелательным образом, без абляции или обугливания.

  Как работает технология

  Лазерное облучение мягкого неба нагревает ткань, что приводит к быстрому сокращению тканевых волокон коллагена, когда температура достигает примерно 60 ° C (140 ° F) 2.Примерно при этой температуре нарушается сшивка коллагеновых фибрилл, которые являются строительными блоками соединительной ткани мягкого неба. Это локализованное разрушение коллагена заставляет нижележащую более глубокую ткань оттягивать вышележащую поврежденную ткань внутрь и образовывать новые случайные поперечные сшивки после охлаждения. (2) (3) (4)

  Когда ткань начинает фазу ремоделирования, дополнительный коллаген набирается вокруг новой конфигурации, которая проявляет повышенную жесткость. Эффект аналогичен тому, что наблюдается в рубцовой ткани.Это рубцовидное образование характеризуется пониженной податливостью тканей неба и язычка, что сводит к минимуму вибрацию тканей и храп. Эти явления обычно связаны с продолжительностью жизни более года. (5)

  Сводка графика

  На приведенном выше графике показана глубина поглощения света на различных длинах волн в слизистой оболочке полости рта. Для получения сильного лечебного эффекта лазерная энергия должна быть доставлена ​​в богатый коллагеном слой собственной пластинки.Длина волны лазера Nd: YAG (неодима) поглощается глубоко в ткани, в то время как длина волны лазера Er: YAG (эрбия) поглощается поверхностно. Длина волны CO2-лазера SOLEA поглощается на нужной глубине, чтобы эффективно передавать энергию собственной пластинке. (9)

  (9) Д. Фантарелла и Л. Котлов, «Стоматологический лазер на углекислом газе в 21.3 часа: техническая разработка и ранний клинический опыт».

  J. Laser Dent. J Laser Dent. т. 2222, нет. 11. pp. 10-27, 2014.

  Нёбный храп

  Нёбный храп является наиболее распространенным типом храпа, а также типом храпа, который лечится с помощью SOLEA Sleep.Это звук, который возникает, когда воздух проходит мимо расслабленных тканей мягкого неба, заставляя ткани вибрировать. Свободное, мягкое небо частично закрывает дыхательные пути (как показано на рисунке ниже) и вызывает обычный «трепещущий» звук, связанный с громким храпом.

  Сжатие мягкого неба для уменьшения храпа неба
  

  SOLEA Sleep – это средство от храпа неба. Этот тип храпа вызывается рыхлым и мягким небом, в результате чего больной издает «трепещущий» звук при дыхании во время сна. Этот звук мы знаем как «храп».”

  Solea Sleep направлена ​​на уменьшение храпа неба за счет сжатия мягкого неба пациента. Исследования методов использования лазеров таким образом относятся к 2002 году. (1) Первоначально исследователи стремились найти менее инвазивную альтернативу увулопалатофарингопластике, хирургическому лечению, которое включает иссечение частей мягкого неба и язычка для открытия дыхательных путей. Это привело к развитию нехирургических подходов к лечению, которые были направлены на сокращение ткани, а не ее удаление.

  (1) Ван.и другие. Лазерная «жесткость» мягкого неба: альтернатива увулопалатофарингопластике. Лазеры в хирургии и медицине. 2002.30: 40-43.

  (2) Wehrhan F. Schultze-Mosgau S, Schliephake H.6 Основные особенности слизистой оболочки полости рта. 2009: 83-99.)

  (3) Хагиос К. Лохтер А. Бисселл MJ. Архитектура ткани: главный регулятор эпителиальной функции? Philos Trans R Soc B Biol Sci. 1998; 353 (1370): 857-870. doi: 10.1098 / rstb.1998.0250

  (4) Sionkowska A. Skopinska-Wisniewska J. Gawron M.Козловска Дж., Планецка А. Химическое и термическое сшивание гидролизатов коллагена и эластина. Int J Biol Macromol. 2010; 47 (4): 570-577. DOI: 10.1016 / j.ijbiomac.2010.08.004

  (5) Фон ден Хофф. Йоханнес и Мальта. Яап и Куиджперс-Ягтман, Энн. (2013). Заживление небных ран: влияние рубцов на рост. 10.1007 / 978-3-642-30770-6_14

  Этапы заживления тканей

  Нагревание лазером приводит к нарушению сшивки коллагеновой сети в ткани.Стягивание ткани происходит в результате реакции заживления ран, которая генерирует новый коллаген и эластин.

  Заживление ран состоит из трех фаз: воспаления, разрастания и созревания. Фаза созревания является заключительной фазой процесса заживления раны и включает преобразование коллагена типа III в коллаген типа I. Структура коллагена типа I подобна рубцовой ткани и более жесткая, чем коллаген типа III. Этот тип изменения тканей связан с продолжительным эффектом, который сохраняется в течение 12 месяцев и более.

  Преимущества спокойного сна

  Сон играет жизненно важную роль для хорошего здоровья и благополучия на протяжении всей вашей жизни. Достаточно качественный сон в правильное время может помочь защитить ваше психическое и физическое здоровье, качество жизни и безопасность.

  То, как вы себя чувствуете, когда вы бодрствуете, частично зависит от того, что происходит во время сна. Во время сна ваше тело работает, чтобы поддерживать здоровую работу мозга и поддерживать ваше физическое здоровье. У детей и подростков сон также способствует росту и развитию.

  Роль стоматологии в лечении нарушений дыхания, связанных со сном. Утверждено Палатой делегатов ADA в 2017 г. SRBD являются потенциально серьезными заболеваниями, вызванными анатомическим коллапсом дыхательных путей и измененными механизмами контроля дыхания. Общие SRBD включают храп, синдром сопротивления верхних дыхательных путей (UARS) и обструктивное апноэ во сне (OSA). OSA ассоциируется с метаболическими, сердечно-сосудистыми, респираторными, стоматологическими и другими заболеваниями.У детей недиагностированный и / или нелеченый ОАС может быть связан с сердечно-сосудистыми проблемами, задержкой роста, а также проблемами с обучением и поведением.

  Стоматологи могут играть и играют важную роль в мультидисциплинарной помощи пациентам с определенными нарушениями дыхания, связанными со сном, и имеют все возможности для выявления пациентов с повышенным риском SRBD. SRBD может быть вызван рядом многофакторных медицинских проблем, и поэтому лучше всего лечить с помощью совместной модели. Работая вместе с нашими коллегами в области медицины, стоматологи используют различные методы лечения этих заболеваний.У детей признание стоматологом неоптимального раннего черепно-лицевого роста и развития или других факторов риска может привести к направлению к врачу или ортодонтическому / ортопедическому вмешательству для лечения и / или предотвращения SRBD. Существуют различные хирургические методы лечения SRBD. Оральные приспособления, в частности индивидуализированные, титруемые устройства, могут улучшить SRBD у взрослых пациентов по сравнению с устройствами без терапии или плацебо. Оральная терапия (ОАТ) может улучшить ОАС у взрослых пациентов, особенно у тех, кто не переносит постоянное положительное давление в дыхательных путях (СРАР).Стоматологи – единственный поставщик медицинских услуг, обладающий знаниями и опытом для предоставления ОАТ.

  Роль стоматолога в лечении SRBD включает в себя следующее:

  • Стоматологам рекомендуется проверять пациентов на SRBD как часть всеобъемлющего медицинского и стоматологического анамнеза, чтобы распознать такие симптомы, как дневная сонливость, удушье, храп или апноэ при наблюдении оценка факторов риска, таких как ожирение, ретрогнатия или гипертония. Если риск SRBD определен, этих пациентов следует при необходимости направить к соответствующим врачам для постановки правильного диагноза.
  • У детей скрининг на основе анамнеза и клинического обследования может выявить признаки и симптомы недостаточного роста и развития или другие факторы риска, которые могут привести к проблемам с дыхательными путями. Если риск SRBD определен, вмешательство в виде направления к врачу / стоматологу или лечения на основе доказательств может быть целесообразным для лечения SRBD и / или развития оптимальных физиологических дыхательных путей и характера дыхания.
  • Оральная терапия является подходящим методом лечения легкого и умеренного апноэ во сне, а также тяжелого апноэ во сне, когда пациент не переносит CPAP.
  • Когда терапевт назначает терапию оральным аппаратом через письменное или электронное распоряжение взрослому пациенту с обструктивным апноэ во сне, стоматолог должен оценить пациента на предмет целесообразности изготовления подходящего орального приспособления. Если это будет сочтено целесообразным, стоматолог должен изготовить оральный прибор.
  • Стоматологи должны получить соответствующее согласие пациента на лечение, в котором рассматривается предлагаемый план лечения, все доступные варианты и любые потенциальные побочные эффекты использования ОАТ и ожидаемый срок службы прибора.