Термотолерантные колиформные бактерии
Определение: Термотолерантнымиколиформными бактериями или сокращенно ТКБ называются микроорганизмы, которые при температуре 45 градусов по Цельсию посредством биохимической переработки преобразовывают лактозу до кислоты, газа и альдегида. К этой группе относятся следующие представители:
- Klebsiella
- Enterobacter
- Citrobacter
Характерные свойства: обладают такими же признаками, что и общие колиформные бактерии. По виду эти микроорганизмы напоминают палочкии относятся к грамотрицательным бактериям. Так как при проверке воды их легко вычислить, палочки целесообразно использовать для проверки качества жидкости и оценки очистительных систем, которые удаляют фекальные загрязнения. Наименьшая погрешность у индикатора E.Coli. Именно поэтому при выявлении большой концентрации термотолерантныхколиформ советуется делать проверку воды именно на E.
Coli, особенно если нет возможности провести комплексные проверки, а показатель необходим немедленно.
Среда обитания
ТКБ содержатся в пищеварительной системе человека и отходах его жизнедеятельности. Это относится также и к животным. Кроме того, микроорганизмы данной группы находятся в воде и грунтах, что приводит к заболеваниям, возникающим из-за патогенов. ТКБ представляют опасность для человека только в случае превышения предельно допустимых концентраций.
В случае проверки воды на качество важно знать, что различные штаммы имеют разное эпидемиологическое и санитарное значение. Если в жидкости обнаружены представители Escherichia, то загрязнение было недавно, а если Citrobacter или Enterobacter, то заражение состоялось в течение пары недель.
Вред термотолерантныхколиформ
Они могут обладать как условно-патогенными, так и патогенными свойствами. Если бактерии находятся в кишечнике человека, то на его микрофлору они влияют положительно, принимая участие в синтезе и переработке витаминов, а также метаболизме белков и углеводов.
В случаях, когда колиформы размножаются очень быстро, они приобретают патогенную форму и вызывают заболевания. Для этого есть следующие причины:
- Низкий иммунитет
- Прием лекарств
- Снижение защитных функций слизистых
Если колиформы действуют на человеческий организм в качестве патогенов, то могут возникать инфекционные заболевания, интоксикация и диарея.Однако прием воды с наличием этих бактерий, не всегда приводит к болезням – все зависит от силы иммунитета.
Способы определения колиформов
По причине того, что ТКБ имеют одинаковые признаки с ОКБ, методы выявления у них также идентичные. Обе категории причислены к индикаторной группе и необходимы для выявления уровня заражения воды. Но ТКБ намного устойчивее к влиянию внешней среды. Следовательно, если в воде обнаружены ТКБ, то она гарантированно загрязнена отходами жизнедеятельности.
Чаще всего используется метод мембранных фильтров,суть которого состоит в исследовании 3 образцов объёмом 100 мл, которые проходят через 3 фильтра, изготовленных из нитроцеллюлозы.
Перед этим фильтры нужно выдержать и затем прокипятить 15 мин в дистиллированной воде. После этого образцы опускают в среду Эндо и выдерживают при 44 градусах на протяжении суток. В случае, если за это время бактерии начали развиваться, количество подсчитывается и идентифицируется штамм. Лактозоположительные колонии отличаются темно-красным цветом, оставленным на фильтре, а лактозоотрицательные – розовым. Если же за 24 часа рост бактерий не произошел или они относятся к другому виду, то считается, что ТКБ не выявлены.
Микробиологический анализ может применяться в отдельных случаях. Различают 3 вида такого анализа: стандартный, расширенный и направленный на конкретные микроорганизмы. Выбор анализа зависит от доступных возможностей лаборатории и особой необходимости. Расширенный анализ подразумевает вычисление титр колифагов и спор бактерий, а стандартный – выявляет концентрацию ОКБ и ТКБ.
Методы очистки
Если проверка показала наличие колиформных бактерий, выполняются следующие методы предотвращения загрязнения и непосредственно очищения воды:
- Техобслуживание водонапорных систем.
Зачастую для предотвращения заражения хватает регулярного техобслуживания, которое убирает источник засорения.
- Шоковое обеззараживание используется для дезинфекции жидкости посредством большой дозы диоксида хлора. Способ хорошо использовать, когда засорение произошло один раз или временно. Особенно эффективен, когда показатель загрязнения низкий.
- Метод непрерывной дезинфекции.При использовании этого способа нужно установить дезинфицирующуюсистему, которая будет работать постоянно. Нужно применять, если второй метод не справился с задачей.
Зачастую для предотвращения заражения хватает регулярного техобслуживания, которое убирает источник засорения.
Термотолерантные колиформные бактерии в воде
Термотолерантные колиформные бактерии – это группа микроорганизмов, ферментирующих лактозу при температуре 45 °C. В состав группы входят представители рода Escherichia, также известного как E.Coli, и отдельные представители Klebsiella, Enterobacter и Citrobacter. ТКБ отличаются простотой выявления при анализе, за счет чего часто используются в виде показателя качества воды и эффективности очистки от фекальных бактерий.
Наиболее точным индикатором является E.Coli, поскольку другие термотолерантные микроорганизмы могут происходить от других источников.
ВОЗ рекомендуется проводить анализ воды на точное выявление E.Coli при обнаружении высокого содержания количества термотолерантных бактерий. В частности, это касается случаев, когда возможности осуществления комплексных микробиологических проверок нет, а результат требуется получить срочно.
Особенности ТКБ
Колиформные бактерии живут в пищеварительном тракте, а также отходах жизнедеятельности человека. Это же касается и животных, в частности, скота. Помимо прочего, бактерии можно найти в почве и воде, загрязнение которых впоследствии может приводить к возникновению заболеваний, вызываемых патогенами. Данный вид микроорганизмов относится к классу грамотрицательных бактерий и формой напоминает палочку. Микроорганизмы имеют большое количество разновидностей, однако опасны они для человека в той или иной степени только при превышении допустимой концентрации.
При определении качества воды из того или иного источника следует помнить, что колиформы имеют разное эпидемиологическое и санитарное значение – так, представители рода Escherichia указывают на заражение, которое произошло недавно. Наличие же Citrobacter или Enterobacter означает, что загрязнение произошло в течение последних нескольких недель.
Подробная информация об услугеХимический Анализ Воды
О вреде термотолерантных бактерий
Колиформы могут быть условно-патогенными – среди всех родов таких насчитывается 15 видов. В человеческом организме они проживают в нижних отделах кишечного тракта, оказывая благотворное влияние на микрофлору, помогая усваивать и синтезировать витамины, а также ускоряя разложение белков и углеводов. Патогенными, то есть вызывающими различные заболевания, они могут стать при изменении условий среды. В таком случае может развиться их избыточное размножение.
Происходить это может по разным причинам – например, при снижении иммунитета, гибели нормальной микрофлоры во время приема лекарств или угнетении защитных свойств слизистых.
Однако, это далеко не гарантирует появление заболеваний у человека, который пьет воду с содержанием данных микроорганизмов.
Определение термотолерантных колиформов
Так как термотолерантные колиформные бактерии по всем признакам схожи с общими – и это логично, так как они являются их подгруппой, определение ТКБ производится с применением идентичных методов. Приоритетные варианты основаны на способности микроорганизмов ферментировать лактозу в течение 24 часов при условии соблюдения оптимальной температуры. Она составляет 44 °C с погрешностью 0,5 °C.
Как и ОКБ, термотолерантные бактерии относятся к индикаторной группе, используясь для определения уровня загрязненности воды. Однако данная категория микроорганизмов более устойчива к воздействию окружающей среды. По этой причине обнаружение ТКБ указывает на однозначное загрязнение воды продуктами жизнедеятельности человека.
Применение метода мембранных фильтров
Определение колиформных микроорганизмов чаще всего производится с применением метода мембранных фильтров.
В рамках данного исследования три образца по 100 мл пропускаются через три бактериальных фильтра из нитроцеллюлозы. Предварительно фильтр помещается в дистиллированную воду и прокипячивается в течение 15-20 минут.
Далее образцы помещаются в среду Эндо и инкубируются в течение 24 ч при температуре 44 °C (для общих бактерий градус должен быть ниже). Если в рамках данного времени был установлен факт развития бактерий, подсчитывается их количество (речь о лактозоположительных колониях), после чего остается идентифицировать их как колиформные бактерии.
Если в течение суток рост колоний не наблюдается или же он имеет место, но колонии относятся к другому типу микроорганизмов, результат считается отрицательным. Положительной реакцией станет наличие лактозоположительных колоний, которые дают отпечаток темно-красного цвета на обратной стороне фильтра, или же лактозоотрицательных, имеющих розовый оттенок. В таком случае производится подсчитывание числа колоний всех установленных типов.
Чтобы определить, к какой категории относятся бактерии, делается их посев, после чего производится инкубирование при температуре 44 °C еще 16-18 часов. Дальнейшие манипуляции осуществляются исключительно с чистыми культурами. В виде подтверждающих тестов задействуется оксидазный, а также тест образования кислоты и газа при ферментации лактозы.
Микробиологический анализ
В некоторых случаях для определения колиформных бактерий может проводиться микробиологический анализ. В зависимости от необходимости и возможностей лаборатории он может быть стандартным, расширенным, или направленным на выявление определенных микроорганизмов. Стандартный анализ затрагивает три показателя – общее микробное число, а также количество ОКБ и ТКБ. Расширенное исследование также направлено на определение титр колифагов и спор сульфитредуцирующих бактерий.
Анализ воды на колиформные бактерии в лаборатории «НОРТЕСТ»
Правильность проведения анализа на ОКБ и ТКБ зависит не только от соблюдения правил во время процедуры, а также применения правильных реагентов и инструментов.
Важно также не допустить порчи проб во время их забора – с этим справятся специалисты нашего испытательного центра. С учетом того, что образцы будут действительны в течение всего двух часов, мы обеспечим правильный отбор и быструю доставку с соблюдением правил хранения и транспортировки.
Испытательный центр «НОРТЕСТ» предлагает возможность заказать анализ воды на содержание термотолерантных колиформных бактерий с использованием современного оборудования. Наши специалисты не только произведут исследование, но и при необходимости помогут в разработке эффективных средств по очистке в случае, если результат анализа окажется негативным. Среди таких решений можно отметить термообработку, воздействие сильных окислителей, а также использование ультразвука.
Сравнение плотности термотолерантных кишечных палочек и кишечной палочки в пресноводных водоемах
Braz J Microbiol. апрель-июнь 2012 г.; 43(2): 675–681.
Опубликовано в Интернете 1 июня 2012 г. doi: 10.1590/S1517-83822012000200032
Элайс М.
Хачич, * Мариса Ди Бари, Ана Паула Г. Крист, Клаудия К. Лампарелли, Соланж Ине З. Рамос и Мария Sato
Информация об авторе Примечания к статье Информация об авторских правах и лицензиях Заявление об отказе от ответственности
Анализ фекальных бактериальных индикаторов широко используется для контроля качества воды. Это исследование было разработано для определения соотношения между плотностью Escherichia coli и другие термоустойчивые бактерии группы кишечной палочки (TtC) из проб пресной воды, собранных в течение двухлетнего периода мониторинга. ТтК подсчитывали методом мембранной фильтрации на агаре mFC. Подсчет E. coli проводили двумя методами: колонии TtC, идентифицированные в mFC, инокулировали в EC-MUG, или образцы воды фильтровали и инокулировали в модифицированную агаровую среду mTEC, и оба метода сравнивали для количественного выделения E. coli. Результаты показали средний процент E. coli среди других термотолерантных БГКП (соотношение E.
coli /TtC) 84,3% в среде mFC. Принимая во внимание эти результаты, обязательный стандарт 1000 термоустойчивых кишечных палочек будет соответствовать 800 E. coli , и принятие этих стандартов, основанных на E. coli , будет представлять собой значительное улучшение для мониторинга качества пресной воды.
Ключевые слова: Термотолерантные кишечные палочки (TtC), E. coli , Качество воды, микробиологические стандарты
Колиформные бактерии являются широко используемым бактериальным индикатором санитарного качества воды (18, 19). Они определяются как представители родов или видов семейства Enterobacteriace, способные к росту при 37°C (общие колиформы) или 44–45°C (термотолерантные колиформы), обладающие β-галактозидазой (9). Колиформные бактерии в изобилии содержатся в фекалиях теплокровных животных, но их также можно найти в почве, водной среде и растительности. В отличие от других колиформных бактерий, Escherichia coli имеют почти исключительно фекальное происхождение и могут быть обнаружены в повышенных концентрациях в фекалиях человека и животных, сточных водах и воде, подвергшейся недавнему фекальному загрязнению.
Поэтому он считается лучшим микроорганизмом-индикатором фекалий (9, 24).
Фекальные бактерии использовались в качестве индикатора возможного присутствия патогенов в поверхностных водах и риска заболевания на основании эпидемиологических данных о заболеваниях, передающихся через воду. Следовательно, из-за трудностей обнаружения многих возможных патогенов (например, Salmonella sp, Shigella sp, диареогенные E. coli , Giardia lamblia , Cryptosporidium parvum и кишечные вирусы) концентрации фекальных бактерий, включая термотолерантные колиформы, энтерококки 13, 90 li coli и 13 E.900 в первичные индикаторы фекального загрязнения (23). Исследования показывают, что E. coli является более надежным индикатором фекального загрязнения и наличия патогенов в воде, чем общие и термотолерантные колиформные бактерии (9)., 16). Поэтому было предложено использовать E. coli в качестве основного бактериального индикатора вместо других колиформных бактерий в программах мониторинга качества воды, которые адаптируют микробиологическое качество воды.
Фактически, Агентство по охране окружающей среды США рекомендует E. coli или энтерококки для замены фекальных колиформных бактерий в государственных стандартах качества воды на основании исследований, показавших статистически значимую взаимосвязь между E. coli и концентрации энтерококков в пресной воде и заболеваемости, связанной с плаванием. Эти исследования, проведенные с 1979 по 1982 год на пресноводных пляжах озера Эри, штат Пенсильвания, и озера Кистоун, штат Оклахома, ясно продемонстрировали более высокий риск желудочно-кишечных заболеваний на пляжах с наибольшей степенью фекального загрязнения. Среди оцененных индикаторов фекального загрязнения (фекальные колиформы , E. coli и энтерококки) E. coli и энтерококки показали наилучшую корреляцию с желудочно-кишечными симптомами, связанными с плаванием, тогда как фекальные колиформы показали небольшую корреляцию или не имели никакой связи (20). Текущие критерии EPA для рекреационной воды определяют, что среднее геометрическое указанных плотностей бактерий не должно превышать 126 в течение 9 лет.
0013 E. coli или 33 для энтерококков в 100 мл пресной воды на основе статистического количества проб (как правило, не менее 5 проб, распределенных через равные промежутки времени в течение 30-дневного периода) (21). Принимая во внимание предыдущие критерии, используемые USEPA для подсчета TtC (среднее геометрическое 200/100 мл пресной воды), текущая плотность E. coli 126/100 мл соответствует 63% от общей плотности TtC (23).
Недавно исследование, проведенное Garcia-Armisen et al. (12) показал средний процент 77% от E. coli среди других TtC в 166 образцах, взятых из реки Сена (Франция). Корреляция, обнаруженная в этом исследовании, предлагает научно обоснованный параметр, который можно использовать для преобразования исторических данных TtC, поскольку Европейский Союз (ЕС) примет E. coli в качестве микробиологического критерия для определения качества рекреационной воды (10).
Кроме того, многие страны до сих пор используют регистрацию TtC, чтобы обеспечить правовую основу для государственной оценки качества воды.
Например, согласно канадскому законодательству либо E. coli или фекальные колиформные бактерии можно использовать, если опыт показывает, что более 90% фекальных колиформных бактерий составляют E. coli (15).
Качество поверхностных вод в Бразилии в основном регулируется федеральными законами, которые определяют классификацию вод и руководящие принципы, основанные на использовании воды. Постановление 357/2005 Национального совета по окружающей среде (7) устанавливает микробиологические стандарты воды для различных целей на основе термотолерантных колиформ, но позволяет государственным агентствам по охране окружающей среды принимать E. coli для такой оценки путем установления собственных критериев. Что касается рекреационной деятельности, существует специальный регламент (6), в котором уже установлены стандарты для TtC, E coli и энтерококков.
Настоящее исследование было разработано для оценки соотношения между E. coli и TtC в водоемах с целью научной поддержки будущего пересмотра действующих стандартов, определяющих санитарное качество воды.
Знание отношения E. coli /TtC, подходящего для пресноводных участков, позволит преобразовать исторические микробиологические записи, выраженные в TtC, в E. coli , обеспечивающий параметр сравнения для настоящего и будущего мониторинга воды. Также можно будет стандартизировать более строгие критерии контроля качества воды по всей системе водоснабжения.
Отбор проб
Это исследование проводилось в течение двух лет, с января 2004 г. по декабрь 2005 г., на 25 участках из различных водоемов штата Сан-Паулу (). Отбор проб проводился раз в два месяца на 18 участках рек и ежемесячно на семи участках рекреации, расположенных в двух водохранилищах, всего 380 проб. Эти водные объекты были выбраны исходя из уровня их загрязнения и источников загрязнения.
Таблица 1
Географическое расположение 25 мест сбора
| Географическое положение | ||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Водный объект | 1 | Широта | Долгота | |||||||
| Река Параиба | 1 | 23 18 48 | 45 58 20 | |||||||
| Гранд-Ривер | 2 | 23 24 42 | 70126 45 27 39| Река Пардо | 3 | 21 06 00 | 47 45 44 | 4 | 22 57 14 2 70127 | | |
| Река Атибая | 5 | 23 06 12 | 46 32 42 | |||||||
| Река Ягуари | 6 | 22 41 56 | 47 09 07 | |||||||
| Река Корумбатаи 6 | 22 38 01 | 47 40 58 | ||||||||
| Река Капивари | 8 | 23 00 22 | 47 06 00 | |||||||
| река Тиете | 9 | 23 31 11 | 4 9 27 | |||||||
| 10 | 23 32 55 | 46 08 09 | ||||||||
| 11 | 22 57 25 | 47 49 23 | ||||||||
р. 126 46 23 05 | ||||||||||
| Река Жундиаи | 13 | 23 38 56 | 46 11 48 | |||||||
| река Моги | 14 | 23 51 08 | 46 22 41 | |||||||
| 15 | 21 00 44 | 48 10 20 | ||||||||
| Сорокаба р. 0127 | ||||||||||
| Река Агуапей | 18 | 21 40 35 | 50 35 21 | |||||||
| 19 | 23 46 37 | 46 32 01 | ||||||||
| Резервуар Биллингса | 23 46 18 | 46 30 50 | ||||||||
| 21 | 23 46 37 | 46 37 09 | ||||||||
| 22 | 23 40 30 | 46 43 51 | ||||||||
| 46 44 41 | ||||||||||
| Водохранилище Гуарапиранга | 24 | 23 41 48 | 46 43 11 | |||||||
| 25 | 23 42 53 | 12 758 46 | ||||||||
Открыть в отдельном окне
Пробы воды отбирали в стерильные 500 мл, широкое горлышко, пластиковые бутылки, по данным Американской ассоциации общественного здравоохранения (2), хранятся на льду для транспортировки и обрабатываются в течение 24 часов.
Бактериологический анализ
За период наблюдения методом мембранной фильтрации было проанализировано 380 проб воды. Подсчет термотолерантных кишечных палочек проводился с использованием агара на основе лактозы (mFC: мембранные фекальные колиформы), рекомендованного Американской ассоциацией общественного здравоохранения (2) с 1971. Типичные колонии на агаре mFC были дифференцированы в среду E. coli с использованием среды EC-MUG ( Escherichia coli -метилумбеллиферил-β-D-глюкуронид).
166 образцов, собранных в 2005 г., также были проанализированы непосредственно на E. coli с использованием модифицированного mTEC (мембранного термотолерантного Escherichia coli ) агара (4, 22). Эта среда на основе ферментов может давать надежные подтвержденные результаты через 24 часа (8) и использовалась другими авторами для изучения штаммов E. coli 9.0014/коэффициент термотолерантных кишечных палочек (11, 14).
В зависимости от ожидаемой степени фекального загрязнения различные объемы каждого образца (70, 25 и 5 мл) или десятичные разведения по 1 мл фильтровали через фильтры с сетчатой мембраной из смешанных эфиров диаметром 4,5 см и размером пор 0,45 мкм, для достижения диапазона от 20 до 60 подсчитываемых TtC или E.
coli колониеобразующих единиц (КОЕ). Фильтры, содержащие разный объем образцов, переносили на поверхность пластин mFC или mTEC. Планшеты mFC инкубировали при 44,5 ± 0,2°C в течение 20 ± 2 часов. Модифицированные планшеты mTEC предварительно инкубировали при 35 ± 0,5°С в течение 2 ч, а затем инкубировали при 44,5 ± 0,2°С в течение 22 ч. Синие колонии на mFC считали TtC. В соответствии с классическими процедурами, установленными для проверки или дифференциации колоний в методе мембранной фильтрации (2), десять типичных колоний синей кишечной палочки на среде mFC были случайным образом отобраны из мембранного фильтра для каждого тестируемого образца. Каждую отобранную колонию инокулировали в среду EC-MUG и инкубировали при 44,5 ± 0,2°С в течение 24 часов. Одновременно колонии, подвергнутые дифференцировке на EC-MUG, высевали на агар с эозином и метиленовым синим (EMB-агар). Колиформные типичные колонии на агаре EMB, происходящие из EC-MUG-отрицательных колоний, идентифицировали с помощью API 20E (Biomérieux, Франция).
Рост в EC-MUG исследовали на флуоресценцию в длинноволновом (365 нм) УФ-свете для определения активности β-глюкуронидазы. Колонии с положительной активностью β-глюкуронидазы считались E. coli колоний. На модифицированной среде mTEC красно-пурпурные колонии были идентифицированы как E. coli КОЕ без дополнительных подтверждающих тестов.
Статистический анализ
Количество колоний термоустойчивых кишечных палочек (агар mFC) и E. coli в обеих средах (mFC + EC-MUG и модифицированный mTEC) были преобразованы в значения log 10 для обеспечения нормальности данных. Чтобы сравнить методы анализа mFC + EC-MUG с модифицированным mTEC, был проведен парный t-критерий. Линейная регрессия между количеством TtC на агаре mFC и подсчетов E. coli с EC-MUG, а также подсчетов E. coli , полученных с модифицированным агаром mTEC, проводили для определения отношения E. coli /TtC, полученного этими двумя методами.
Средний процент E.
coli , выделенных из среды mFC и дополнительно подтвержденных тестом EC-MUG, составил 84,3%. показывает линию регрессии, изображающую сильную положительную корреляцию между подсчетами TtC на агаре mFC и подсчетами E. coli с EC-MUG с коэффициентом корреляции (r) 0,9.96, что позволяет предположить, что почти 80% колоний TtC, выделенных из среды mFC, представляют собой изолятов E. coli в проанализированных пробах воды.
Открыть в отдельном окне. , парный t-критерий продемонстрировал отсутствие существенных различий между количеством колоний, полученным методом mFC + EC-MUG, и количеством, полученным при выделении mTEC. Таким образом, метод мембранной фильтрации с использованием модифицированного агара mTEC можно использовать для мониторинга E. coli для качества пресной воды.
Изолированные колонии с отрицательной активностью β-глюкуронидазы в среде EC-MUG тестировали на кишечные бактерии с помощью системы API-20E (BioMérieux, Франция).
Распределение MUG-негативных колиформ, выделенных из среды mFC, представлено в . Наблюдалось преобладание рода Klebsiella (60,6% от K. pneumoniae ). Кроме того, 25,9% колоний были идентифицированы как MUG-отрицательные E. coli 9.0014 бактерии. Эти данные согласуются с Bordalo (5), который продемонстрировал преобладание бактерий рода Klebsiella среди MUG-негативных бактерий, выделенных из водной среды. Алонсо и др. . (1) сравнили характеристики хромогенных питательных сред для выделения E. coli и TtC и обнаружили, что Citrobacter freundii является доминирующим видом в пробах речной и морской воды.
Таблица 2
Количество, процентное содержание и виды термотолерантных кишечных палочек, выделенных на агаре mFC и отрицательных на EC-MUG
| ВИД | КОЛИЧЕСТВО ИЗОЛЯТОВ/ПРОЦЕНТ (%) | |||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Klebsiella pneumoniae pneumoniae | 7 0127 | |||||||||||
| Кишечная палочка (МУГ -) | 151 /25,9 | |||||||||||
| Enterobacter cloacae | 20/3,4 | |||||||||||
| Klebsiella terrigena | 90/127 4 20/3,4||||||||||||
| Enterobacter aerogenes | 15/2,6 | Citrobacter freundii | 14/2,4 | Pantoea sp | 7 2 Klebsiella pneumoniae ozaenae | 2/0,3 | Klebsiella ornithinolytica | 1/0,2 | Stenotrophomonas maltophila | 1/0,2 | 7 904ae 14 | 1/0,2 |
| Kluyvera sp | 1/0,2 | |||||||||||
| Leclercia adecarboxylata 27 | ||||||||||||
| Serratia liquefaciens | 1/0,2 | |||||||||||
| ВСЕГО | 584/100 |
Открыть в отдельном окне
Двенадцать образцов показали более высокую концентрацию E.
coli в среде mTEC, чем концентрация TtC, обнаруженная в среде mFC, что означает, что для этих образцов пропорция E. coli /TtC колебался от 1,3 до 3,19 (данные не показаны). Поскольку E. coli относится к группе термотолерантных кишечных палочек, это соотношение не должно превышать 1,0. Эти результаты можно объяснить большей чувствительностью модифицированного агара mTEC (хромогенный метод, основанный на обнаружении β-глюкуронидазы) по сравнению с агаром mFC (метод на основе лактозы).
В недавнем обзоре методологии Hamilton et al. (14) обсудили пропорцию отношения E. coli /TtC, обнаруженную в нескольких исследованиях, в которых анализировались пробы воды из различных сред, показав, что эта пропорция во многих случаях может превысить идеальный предел 1,0. На самом деле авторы заключают, что наблюдаемые различия могут быть связаны с диапазоном извлечения, полученным с помощью разных методологий, а также с тем, что среды, содержащие хромогенные субстраты, обычно более эффективны в E.
coli восстановление. Взаимосвязь между ферментативными и традиционными методами обнаружения колиформных бактерий в пресной воде изучалась George et al. (13). Они использовали флуорогенные субстраты MUGal (4-метилумбеллиферил-β-D-галактозид) и MUGlu (4-метилумбеллиферил-β-D-глюкуронид) и подтвердили значительную корреляцию между обоими методами. Согласно их исследованию, жизнеспособная, но не культивируемая E. coli может быть обнаружена ферментативным методом. Однако Фрэнси и Дарнер (11) сравнили концентрации E. coli в рекреационных пресных водах с использованием традиционного и модифицированного агара mTEC и пришел к выводу, что хромогенная среда восстанавливает меньше бактерий.
Другие авторы также изучали пропорцию этих индикаторов фекального загрязнения, стремясь преобразовать исторические данные о фекальных колиформных бактериях для оценки плотности E. coli или установить значения E. coli для замены критериев термотолерантных колиформных бактерий.
Расмуссен и Зиглер (17) наблюдали Соотношение E.coli /TtC, равное 0,77, во время исследования, проведенного для оценки санитарного качества выбранных водотоков Канзаса. Гарсия Армисен и др. (12) сообщили о значениях 77% для соотношения E.coli /TtC в пробах пресной воды с различным загрязнением.
Модели линейной регрессии, примененные к результатам, полученным в настоящем исследовании, показали соотношение E. coli /TtC, равное 80%. Например, принимая во внимание эту пропорцию, обязательные нормы 1000 термотолерантных колиформ для пресной воды будут соответствовать примерно 800 Кишечная палочка . Чтобы использовать более строгие критерии, вместо этого можно было бы принять более низкий уровень достоверности модели линейной регрессии (620 E. coli ).
Поскольку E. coli рекомендуется многими исследованиями (9, 12, 14, 16) и публикациями (3, 23, 24) как лучший индикатор для защиты здоровья населения, чем термотолерантные колиформные бактерии, принятие E.
coli Стандарты, основанные на стандарте , будут представлять собой значительное улучшение для микробиологического мониторинга качества воды, предназначенной для использования в качестве источника питьевой воды, орошения сельскохозяйственных культур и аквакультуры.
1. Алонсо Дж.Л., Сориано А., Карбахо О., Аморос И., Гарелик Х. Сравнение и выделение Escherichia coli и термотолерантных колиформных бактерий в воде с хромогенной средой, инкубированной при 41 и 44,5°C. Appl Environ Microbiol . 1999;65(8):3746–3749. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
2. Американская ассоциация общественного здравоохранения. Стандартные методы исследования воды и сточных вод. 21 st ed., 2005. Раздел 9222. Мембранная фильтрация для представителей группы кишечных палочек. Вашингтон, округ Колумбия: Американская ассоциация общественного здравоохранения; [Академия Google]
3. Американская ассоциация общественного здравоохранения. Стандартные методы исследования воды и сточных вод.
Стандартные методы онлайн. 2007. Раздел 9060. Образцы. Вашингтон, округ Колумбия: Американская ассоциация общественного здравоохранения; 2007. [Google Scholar]
4. Американская ассоциация общественного здравоохранения. Стандартные методы исследования воды и сточных вод. Стандартные методы онлайн. 2007. Раздел 9213. Рекреационные воды. Вашингтон, округ Колумбия: Американская ассоциация общественного здравоохранения; 2007. [Google Академия]
5. Бордало А.А. Выделение фекальных колиформ в двух стандартных средах вдоль эстуарного градиента. Вода Res. 1994;28(11):2331–2334. [Google Scholar]
6. Бразилия. Ministério do Meio Ambiente. Comissão Nacional do Meio Ambiente. Resolução CONAMA 274, от 29 декабря 2000 г. Доступно на [http//www.mma.gov.br/port/conama/legiabre.cfm?codlegi=272]. По состоянию на 30 мая 2008 г.
7. Бразилия. Ministério do Meio Ambiente. Comissão Nacional do Meio Ambiente. Resolução CONAMA 357 от 17 марта 2005 г. Dispõe sobre a classificação dos corpos de água e diretrizes ambientais para o seu enquadramento.
Доступно по адресу [http//www.mma.gov.br/port/conama/res/res05/35705.pdf]. По состоянию на 23 февраля 2006 г.
8. Ciebin B.W., Brodsky M.H., Eddington R., Horsnell G., Choney A., Palmateer G., Ley A., Joshi R., Shears G. Сравнительная оценка модифицированных сред m-FC и m-TEC для мембранный фильтр подсчет Escherichia coli в воде. Appl Environ Microbiol. 1995;61(11):3940–3942. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
9. Edberg S.C., Rice E.W., Karlin R.J., Allen M.J. Escherichia coli : лучший биологический индикатор питьевой воды для охраны здоровья населения. Приложение к симпозиуму J Appl Microbiol. 2000;88:106С–116С. [PubMed] [Академия Google]
10. Европейский парламент. Директива 2006/EC Европейского парламента и совета по управлению качеством воды для купания. Официальный журнал Европейского Союза. 2006; I.64(64):37–51. 03.04.2006. [Google Scholar]
11. Фрэнси Д.С., Дарнер Р.А. Сравнение методов определения концентрации Escherichia coli в рекреационных водах.
Вода Res. 2000;34(10):2770–2778. [Google Scholar]
12. Гарсия-Армисен Т., Пратс Дж., Серве П. Сравнение культивируемых фекальных колиформ и Подсчет Escherichia coli в пресных водах. Может J Microbiol. 2007;53(6):798–801. [PubMed] [Google Scholar]
13. Джордж И., Пети М., Серве П. Использование ферментативных методов для быстрого подсчета колиформ в пресной воде. J Appl Microbiol. 2000;88(3):404–13. [PubMed] [Google Scholar]
14. Hamilton W.P., Kim M.K., Thackston E.L. Сравнение коммерчески доступных подсчетных тестов Escherichia coli : последствия для достижения стандартов качества воды. Вода Res. 2005;39(20): 4869–4878. [PubMed] [Google Scholar]
15. Health and Welfare Canada. Руководящие принципы для канадских рекреационных водных ресурсов: министр национального здравоохранения и социального обеспечения. Отавва. Канада: Канадский правительственный издательский центр снабжения и услуг Канады; 1992. [Google Scholar]
16. Leclerc H.
, Mossel D.A.A., Edberg S.C., Struijk C.B. Достижения в области бактериологии группы кишечных палочек: их пригодность в качестве маркеров микробной безопасности воды. Анну Рев Микробиол. 2001; 55: 201–234. [PubMed] [Академия Google] 9eVirginia Virginia: Американская ассоциация водных ресурсов; 2003. Серия технических публикаций AWRA № TPS-03-01. [Google Scholar]
18. Rompré A., Servais P., Baudart J., de-Roubin M.R., Laurin P. Обнаружение и подсчет колиформных бактерий в питьевой воде: современные методы и новые подходы. J Микробиологические методы. 2002;49(1):31–54. [PubMed] [Google Scholar]
19. Tallon P., Magajna B., Lofranco C., Leung K.T. Микробные индикаторы фекального загрязнения воды: современный взгляд. Загрязнение воды, воздуха, почвы. 2005; 166 (1-4 сентября): 139–166. [Google Scholar]
20. Агентство по охране окружающей среды США. Критерии воздействия на здоровье пресных рекреационных вод. 1984. Агентство по охране окружающей среды 600/1-84-004. Август 1984 г.
21. Агентство по охране окружающей среды США. Качество окружающей воды для бактерий – 1986. 1986. EPA 440/5-84-002.
22. Агентство по охране окружающей среды США. Метод 1603. Escherichia coli ( E. coli ) в воде методом мембранной фильтрации с использованием модифицированной термотолерантной мембраны Агар Escherichia coli (модифицированный mTEC) 2002. EPA 821-R-02-023. Сентябрь 2002 г.
23. Агентство по охране окружающей среды США. Руководство по внедрению в отношении качества окружающей воды для бактерий. 2004. Агентство по охране окружающей среды 823-B-004-02.
24. Всемирная организация здравоохранения. Руководство по качеству питьевой воды: Том 1. Рекомендации. 3-й. Genebra: Всемирная организация здравоохранения; 2004. [Google Scholar]
Тестирование фекальных/термотолерантных кишечных палочек – Palintest
Что такое фекальные кишечные палочки?
Фекальные колиформные бактерии, также известные как термотолерантные колиформные бактерии, являются частью общей группы кишечных палочек.
Фекальные колиформы присутствуют в кишечнике и фекалиях теплокровных животных.
Фекальные/термотолерантные кишечные палочки присутствуют в различных областях применения. Ниже мы расскажем, где их можно найти и почему за ними следует следить.
Риски для здоровья, связанные с фекальными кишечными палочками
Большинство типов кишечных палочек безвредны для человека, но некоторые из них могут вызывать легкие заболевания, а некоторые могут привести к серьезным заболеваниям, передающимся через воду. Симптомы заболевания, связанные с фекальными колиформами, могут варьироваться от легких до тяжелых. Симптомы обычно включают расстройство желудка, диарею, ушные инфекции и сыпь
Посмотреть реагенты
Где найти фекальные/термотолерантные кишечные палочки?
Фекальные/термотолерантные кишечные палочки в питьевой воде
Фекальные кишечные палочки могут попадать в воду в результате загрязнения окружающей среды, например, отходами млекопитающих или птиц, сельскохозяйственными стоками и неочищенными человеческими сточными водами.
Обработка для их удаления включает фильтрацию и очистку.В стандарте ВОЗ указано, что для всей воды, предназначенной для питья, и очищенной воды, поступающей в распределительную систему, термоустойчивые колиформные бактерии не должны обнаруживаться ни в одной пробе объемом 100 мл. Если проба воды дает положительный результат на наличие фекальных кишечных палочек, должны быть предприняты немедленные следственные действия. Обычно это повторный отбор проб, и если эти бактерии присутствуют в повторном образце, то причина должна быть немедленно исследована.
В стандарте Агентства по охране окружающей среды США указано, что проба воды небезопасна, если в пробе воды присутствуют бактерии группы кишечной палочки. Кроме того, DWI не дает конкретного значения для термотолерантных кишечных палочек, но указывает максимальное количество на 100 мл для E. coli в питьевой воде при 0,
.Фекальные/термотолерантные кишечные палочки в бассейне и спа
Фекальное загрязнение бассейнов и спа-салонов происходит, когда у человека происходит случайное выделение фекалий или когда фекалии смываются с тела пловца.
Для получения дополнительной информации о том, какие параметры следует тестировать в бассейне и спа, загрузите наше руководство по химии для бассейнов .
Фекальные/термотолерантные кишечные палочки Поверхностные воды
Сельскохозяйственные методы, такие как смыв отходов животноводства в близлежащие ручьи и разбрасывание навоза по полям в дождливые периоды, могут способствовать фекальному заражению кишечной палочкой. Кроме того, септики могут быть перегружены в дождливые периоды, что может привести к попаданию неочищенных человеческих отходов в близлежащие ручьи и реки.
Обработка для их удаления включает фильтрацию и очистку.
Какое оборудование используется для тестирования фекальных/термотолерантных кишечных палочек?
В чрезвычайных ситуациях, таких как стихийные бедствия, необходимо быстро оценить качество воды, чтобы определить ее безопасность.
В нашем наборе Wagtech TM используется микробиологический анализ для быстрого обнаружения фекальных колиформных бактерий в воде. В наборы входит инкубатор Wagtech, специально разработанный для микробиологического тестирования в сложных условиях. С большой вместимостью 20 чашек Петри, до пяти полных циклов на одну зарядку аккумулятора, а также с питанием от сети и аккумулятора; инкубатор позволяет тестировать большие объемы образцов в полевых условиях. Для дальнейшего увеличения емкости инкубации выберите Wagtech Potalab или Wagtech Potatest 2 , который включает в себя два инкубатора. Potalab+ — наша самая передовая портативная лаборатория качества воды с полным цифровым оборудованием для лабораторного уровня точности. Посмотреть полный ассортимент комплектов Wagtech 